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1.从细胞或特定组织中提取总RNA;
2.逆转录实验;
3.扩增内参和目的基因并比较基因表达差异。
适用于长的或具有发卡结构的RNA。适用于rRNA、mRNA、tRNA 等所有RNA的反转录反应。主要用于单一模板的RT-PCR反应。
适用于具有PolyA尾巴的RNA。(原核生物的RNA、真核生物的 Oligo dT rRNA和tRNA不具有PolyA尾巴。)由于Oligo dT要结合到PolyA 尾巴上,所以对RNA样品的质量要求较高,即使有少量降解也会使全长cDNA合成量大大减少。
与模板序列互补的引物,适用于目的序列已知的情况。
RT- PCR首先经反转录酶的作用以RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平、细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA,关键是确保RNA中无RNA酶和基因组 DNA的污染。
用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT 及基因特异性引物中的一种。对于短的不具有发卡结构的真核细胞mRNA,三种都可。
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⑹空气压缩机(含油水分离系统)。 下面就各设备的主要作用及重要参数简单介绍如下: 1.喷涂主机 &n...
RT-PCR反应受多个因素影响,如硫酸镁的浓度, 引物退火的温度,扩增的循环数等。
◇建议选择0.5-3.0 mM (相差0.5 mM)的硫酸镁作初步实验。
◇对于具有较高Tm的引物,增加退火和延伸时的温度对反应有利。较高的温度有利于减少非特异的引物结合,因而提高特异产物的得率。
◇大多数目标RNA经40轮PCR反应就能观察到。但如果目标RNA太稀少,或者只有很少的起始材料,有必要增加扩增的次数到45-50次。
货代公司操作流程操作部工作流程
货代公司操作流程操作部工作流程 I 、客户服务 一、订舱 1. 客户向我司订舱的 2. 客户发来的订舱单需显示以下信息,但不限于此: 1)托运人 /发货人 2)船公司 / 船名 / 航次或船期 3)起运港 4)目的港 /中转港 5)货名 6)柜型、 柜量 7)运价 8)托运人的签字、盖章 3. 客服人员收到订舱单后,须与 SALES核对运价是否正确,并由 SALES在订舱单上签字确认,然 后再向相应船公司订舱 (特殊情况可先口头与 SALES确认 , 待 SALES返回公司再补签字确认 )。向订舱时, 需先在各船公司专用台帐上自编 S/O号。4. 订舱单发出后,客服人员应主动向船公司确认舱位,并将 船公司传回的订舱确认单第一时间传给客户,订舱确认上面的订舱号与船名、航次要清晰、准确,以免 造成混淆。 5. 订舱完毕后,客服人员应及时将资料输入电脑,具体步骤如下: 1) 新建委托 ?C 输
货代公司操作流程操作部工作流程汇总
货代公司操作流程操作部工作流程 I 、客户服务 一、订舱 1. 客户向我司订舱的 2. 客户发来的订舱单需显示以下信息,但不限于此: 1)托运人 /发货人 2)船公司 / 船名 / 航次或船期 3)起运港 4)目的港 /中转港 5)货名 6)柜型、 柜量 7)运价 8)托运人的签字、盖章 3. 客服人员收到订舱单后,须与 SALES核对运价是否正确,并由 SALES在订舱单上签字确认,然 后再向相应船公司订舱 (特殊情况可先口头与 SALES确认 , 待 SALES返回公司再补签字确认 )。向订舱时, 需先在各船公司专用台帐上自编 S/O号。4. 订舱单发出后,客服人员应主动向船公司确认舱位,并将 船公司传回的订舱确认单第一时间传给客户,订舱确认上面的订舱号与船名、航次要清晰、准确,以免 造成混淆。 5. 订舱完毕后,客服人员应及时将资料输入电脑,具体步骤如下: 1) 新建委托 ?C 输
加大截面加固技术,柱外包(粘)型钢加固技术
外粘碳纤维布加固技术,植筋加固技术
托换加固技术,无损开孔成洞加固技术
微细、深层裂缝灌浆加固改造技术
房屋结构纠偏及地基、基础加固技术
外贴钢板加固技术
同华特种加固工程案例分类----建筑加固改造
梁板柱墙的碳纤维、钢板及其他高强纤维粘贴技术;
梁柱钢构套加固技术;
构件加大截面法技术
喷射钢丝(筋)砼技术
高强钢丝(线)网片聚合砂浆加固技术
楼房加层扩建改造技术
砖混结构去除承重墙大开间技术
框架梁柱去除大开间技术
剪力墙、梁、柱、板开洞切割技术
裂缝灌浆技术
钢筋植筋技术
新旧混凝土界面处理技术
火灾、震后加固技术
抗震加固、隔震技术
无损切割技术
粘贴钢板加固法,是指用胶黏剂将钢板粘贴在构件外部的一种加固方法。该法在建筑,桥梁等工程的加固、补强、修复中的应用较为广泛。
用粘结剂粘贴钢板补强、加固的钢筋混凝土结构构件,能大大提高其原设计承载力和抗破坏能力。这是因为粘贴钢板后,提高了原结构构件的配筋量,相应就提高了结构构件的抗拉、抗弯、抗剪等方面的力学性能,而这些性能是靠结构胶粘剂的良好粘结性能,把钢板与混凝土牢固地粘结在一起,形成整体,有效地传递应力,共同工作来保证的。
1、适用于承受静力作用的一般受弯及受拉构件。
2、使用环境温度不超过5~60℃,相对湿度不大于70%及无化学腐蚀的使用条件为限,否则应采取有效的防护措施。
3、当构件混凝上强度等级低于Cl5 时,不宜采用本法加固
粘贴面处理 → 加压固定及卸荷系统准备(根据实际情况和设计要求,卸荷步骤有时省去) →胶粘剂配制 →涂胶和粘贴 → 固化、卸加压固定系统 → 检验 → 维护
表1-1物流技术分类表
物流技术硬技术材料:集装材料、包装材料等机械:装卸机械、包装机械、运输机械等
设施:仓库、车站、港口、机场、铁路、装载、吊装设备等
软技术计划:对流通形态与硬技术进行规划研究与改进的工作
运用:对运输工具的选择使用、装卸方法、库存管理、劳务管理
评价:成本计算等
物流技术与生产技术是比较容易混淆的,下面我们看看它们的区别,通过对比更准确地把握物流技术的概念。
表1-2物流技术与生产技术对比表
生 产 技 术 物 流 技 术
为社会提供有形物质为社会提供无形服务
直接与科学技术新动向相适应间接地被动地适应多样化需求
监测技术这里着重介绍环境监测中污染物的测试技术。如空气检测,水质检测。