根据主要几项生物安全柜国际标准的规定，安全柜可分为一级、二级和三级 三大类以满足不同的生物研究和防疫要求。安全柜的分类级别与生物安全等级无关一级生物安全柜可保护工作人员和环境而不保护样品。气流原理和实验室通风橱一样，不同之处在于排气口安装有HEPA过滤器。所有类型的生物安全柜都在排气和进气口使用HEPA过滤器。一级生物安全柜本身无风机，依赖外接通风管中的风机带动气流，由于不能保护柜内产品，目前已较少使用。

二级生物安全柜是目前应用最为广泛的柜型。按照NSF49的中的规定，二级生物安全柜依照入口气流风速、排气方式和循环方式可分为4个级别:A1型，A2型(原B3型),B1型和B2型。所有的二级生物安全柜都可提供工作人员、环境和产品的保护。

三级生物安全柜是为3-4级实验室生物安全等级而设计的，柜体完全气密，工作人员通过连接在柜体的手套进行操作，俗称手套箱(Glove box)，试验品通过双门的传递箱进出安全柜以确保不受污染，适用于高风险的生物试验。

1.要根据国家标准和有关的规定，向所有可能使用生物安全柜的用户解释安全柜的使用及限制条件。应发给工作人员书面规定或安全手册、操作手册。特别是必须明确告诉工作人员，在出现溅洒、破碎、方法不当的情况下，安全柜无法保护操作人员。 2.安全柜只有在工作正常时才能使用。

3.安全柜前脸的玻璃观察窗不得在安全柜处于使用状态时打开。

4.柜内放置的仪器和材料必须保持在最低数量。静压箱后部的空气循环不得受阻。将材料放入安全柜的工作区之前，应对其表面进行去污处理。

5.柜内不得使用本生灯(一种煤气灯)，因其产生的热会干扰气流并可能损坏过滤器。可以使用微型电焚烧炉，但使用一次性灭菌环则更好。

6.柜内所有的工作要在工作面的中部或后部进行，并能从观察面板中看到。

7.操作手后方的活动要达到最少。

8.操作手不应将手臂来回伸进伸出柜子，以免干扰气流。

9.前送风格栅不得被便签、滴管或其他材料堵住，否则会干扰气流从而可能使材料受到污染，使人员处在暴露状态。

10.应在每次工作完成后及一天结束时，使用合适的消毒剂清洁安全柜的表面。

11.柜子的风扇在工作开始前和工作完成后要再各运行5分钟。

从生物安全柜前脸的开口流入柜内的气流速度约为0.45米/秒。以这一风速，柜内单向流的一致性易受干扰，很容易被安全柜附近人员的走动、开窗、送风配风器、门的开关所干扰。按理想的布置，应放在远离活动及可能有干扰气流的地方。应尽量在安全柜的后侧及两侧留下30厘米的空间，便于维护作业。柜子上方则留下30~35厘米的高度，以便对排风过滤器的风速进行精确测量，并为排风过滤器的更换留下足够空间。

生物安全柜内的所有物品，包括设备，都应在工作完成之后进行表面去污处理并从柜内取出，因为残留的培养介质可能会提供微生物的生长条件。安全柜的内表面应在每次使用前与使用后进行去污处理。要用消毒剂擦拭工作台表面及内壁面，使用的消毒剂应能杀死柜内可能存在的所有微生物。一天工作结束时，应进行最后表面去污处理，即对工作台、各个侧面、背面及玻璃的里面进行全面擦拭。可以使用漂白粉液或70%酒精，这种对目标生物有效的消毒剂。如使用漂白粉液这种有腐蚀性的消毒剂，则要用灭菌水进行二次擦拭。建议工作柜在清洁、消毒时处在工作状态。如果其未处在工作状态，则应运行5分钟，以便在安全柜关闭前将其中的气体清除掉。

对1级和2级生物安全柜的去污，是将适量的低聚甲醛(使柜内空气中的低聚甲醛的最终浓度为80%)置于电热盘或煎锅上(从柜外控制)。另将一个放有比低聚甲醛多10%的碳酸氢的电热盘或煎锅也放在柜内(在柜外控制)。这第二个容器上应带盖，这个盖子可以从远处取下来(例如系在一根线上，线可以从柜外拉动)。这样可以使提前中和的低聚甲醛达到最小。

如果相对温度低于70%，有热水的开口容器。如果没有前隔板，则要用生型塑料挡板，将其用胶带粘在前脸，确保不会有气体漏入房间。当盘内的低聚甲醛已全部挥发或开关已打开1小时后，将开关关闭。将安全柜放置一整晚不得触动。然后将第二个盘子的盖移开并打开其开关，碳酸氢氨开始挥发。这时，关闭盘子的开关，让安全柜开始工作，使碳酸氢氨气循环1小时。然后可以取下前隔板(或塑料挡板)，安全柜即可使用。

选择 生物安全柜的选择最基本取决于生物试验中所使用的试验品类型:

1、如果生物试验中只涉及微生物样品，可以使用基本类型的生物安全柜;

2、如果生物试验中涉及了微生物样品和微量化学试剂(非腐蚀性)，使用装备外排管道的安全柜是必要的。因为HEPA过滤器并不能有效过滤清除化学气体，如果不能外排，将对实验室内工作人员和环境造成威胁;

3、如果生物试验中涉及了细胞毒素类药物，例如各类癌症治疗药物，必须使用的细胞毒素安全柜。

PS:需要明确了解生物安全柜与通风柜/超净工作台的区分。通风柜和超净工作台不属于生物安全柜，不可使用在涉及微生物材料的实验或生产过程中。

通风柜是为在化学实验过程中清除腐蚀性化学气体和有毒烟雾而设计的。由于没有装备HEPA过滤器，通风柜不能有效清除微生物介质。放置在通风柜内微生物样品会散播到柜外，污染实验室环境。

超净工作台是为了保护试验品或产品而设计的，通过吹过工作区域的垂直或水平层流空气防止试验品或产品受到工作区域外粉尘或细菌的污染。一旦微生物样品放置于工作区域，层流空气将把带有微生物介质的空气吹向前台工作人员而产生危险。

生物安全柜的选择最基本取决于生物试验中所使用的试验品类型:

1、如果生物试验中只涉及微生物样品，可以使用基本类型的生物安全柜;

2、如果生物试验中涉及了微生物样品和微量化学试剂(非腐蚀性)，使用装备外排管道的安全柜是必要的。因为HEPA过滤器并不能有效过滤清除化学气体，如果不能外排，将对实验室内工作人员和环境造成威胁;

3、如果生物试验中涉及了细胞毒素类药物，例如各类癌症治疗药物，必须使用的细胞毒素安全柜。

PS:需要明确了解生物安全柜与通风柜/超净工作台的区分。通风柜和超净工作台不属于生物安全柜，不可使用在涉及微生物材料的实验或生产过程中。