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mRNA差异显示技术(mRNA differential display PCR, mRNA DD-PCR),是由Peng Liang等人在1992年建立的筛选基因差异表达的有效方法。它是将mRNA逆转录技术和PCR技术相结合的一种RNA指纹图谱技术。每一种组织细胞(包括同一组织细胞经过不同的处理)都有其特异表达的不同于其他组织细胞的基因谱,即特异的RNA指纹图谱。
组织样品总RNA的提取→去除RNA样品中的微量DNA→设计引物序列→逆转录归类反应体系的建立→PCR选择性扩增→mRNA DD-PCR产物的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳→差异表达条带的回收→回收条带的再次扩增→二次扩增产物的克隆、测序和GenBank查询→Northern Blot和 Dot Blot杂交。
mRNA DD-PCR技术是筛选和克隆差异表达基因的一种快速而行之有效的方法。
差异基因表达是细胞分化的基础。正是这些基因在细胞中的特异表达与否,决定了生命历程中细胞的发育和分化、细胞周期的调节、细胞衰老和死亡等。mRNA DD-PCR技术正是对组织特异性表达基因进 行分离的一种快速而行之有效的方法。不同的组织/细胞或遗传背景相同的同一组织/细胞经过不同的处理后,提取各自的总RNA,进行mRNA的逆转录合成 cDNA。进行逆转录时3'端引物采用oligo(dT)l2MN,其中M为A、C、G中的任何一种,N为A、C、G或T中的任何一种,所以共有12种oligo(dT)l2MN引物。其申M称为锚定引物,起增大引物Tm值的作用。N称为分类碱基,对逆转录进行归类。
用这12种引物分别对同一总RNA样品进行cDNA合成,即进行12次不同的逆转录反应,从而使逆转录的cDNA具有12种类型,也就是对cDNA进行12种归类(目前较为流行的是进行4种归类,即3'端引物采用oligo(dT)12M, M为A、C、G中的任何一种)。5'端引物采用20条由10个碱基组成的随机引物。对每一类cDNA进行随机引物和逆转录引物PCR扩增,通过对不同的组织/细胞或经不同处理的同一组织 /细胞的同一类cDNA的PCR选择性扩增产物的凝胶电泳分析,从而反映出不同样品的基因在时间和空间上的组织特异性表达。简述其基本原理,就是将基因背景相同的2个或几个细胞系或组织mRNA逆转录成cDNA,用不同引物对,进行PCR扩增,扩增时加入同位素标记的核苷酸。用测序胶电泳分离PCR产物,经放射自显影即可找到被扩增的差异表达的基因。
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她如果选用的是不计算损耗的 是没有影响的 钢筋是全国通用的
主要是生产工艺成熟,国内的机器都是购买的国外的二手机器,另外技术培训也不够到位,造成生产的电热膜质量不达标,碳墨不均匀,又没有研发跟进,比如内部的粘合胶的耐高温不达标,造成起鼓,外层材料更是有问题,又...
通常情况下,在某一细胞中或某一个关键的发育时间点上有15000种以上的基因在表达。如此众多种类的mRNA逆转录产物经PCR选择性扩增后其类型依然众多,很难用电泳系统加以快速准确地分离。因而需要对逆转录产物的cDNA进行归类处理,减轻不同PCR产物电泳分离的难度,提高分离的准确率。该方法就具有快速、灵敏和重复性好等优点。
mRNA差异显示法研究杉木木材形成相关cDNA
利用差异显示法(DDRT-PCR)研究杉木的2个自然变异类型(句容0号及独干杉)木材形成过程中基因表达差异。通过银染后切割回收54个差异条带,经2次扩增和纯化、克隆转化及反向Northern杂交验证后共获得29个阳性克隆。测序后进行比对分析,结果表明:1)Blastn比对(分值>60)有9个cDNA克隆在GeneBank中找到了相似的功能,分别与核糖体蛋白基因、信号传导功能、泛素蛋白基因、抗性功能、组氨酸磷酸转移蛋白、细胞发生功能及能量代谢相关;2)Blastx比对有12个序列可进行功能推测;3)还有8个cDNA在数据库中未发现匹配信息。这些信息可为杉木木材形成相关基因的分离和克隆提供研究基础。
中外建筑差异论文
中外建筑差异赏析 论文 年级: 学号: 姓名: 专业: 二零一四年十二月 摘 要:本文通过鉴赏分析中外代表性 古建筑 美术作品,了解不同国家、不同时期建筑美术所呈现出 各自不同的特点, 进一步加深建筑与 美术之间关系的认识, 保护、维修好这些与建筑成为一体的美术作品, 使建筑和美术作品能够完美地结合在一起,为我们今天的社会留下珍贵的文物建筑资料。 关键词: 建筑美术建筑文化建筑 建筑是人类社会文明进步的产物。 早在原始社会, 人们就在为寻找、 建造能够遮风避雨 的生存空间――建筑而辛劳。当人们拥有了这种最基本的生存空间后, 合理、舒适、美观的 目标要求也就自然而然地被提了出来, 并且围绕该目标的实现而在一直进行不懈的努力, 这 种努力也使得建筑学学科本身得到了较大的发展。 目前,人们对建筑的理解早已突破了实用 性的概念, 建筑的艺术性和文化性已被越来越多的人们所接受。 建筑具有物质和精神双
近年来显示技术发展很快,平板显示器以其完全不同的显示和制造技术使之同传统的视频图像显示器有很大的差别。传统的视频图像显示器主要为阴极射线管CRT(Cathode ray tubes);而平板显示器与之的主要区别在于重量和体积(厚度) 方面的变化,通常平板显示器的厚度不超过10cm (4in) ,当然还有其他的不同,如显示原理、制造材料、工艺以及视频图像显示驱动方面的各项技术等。
平板显示器具有完全平面化、轻、薄、省电等特点,符合未来图像显示器发展的必然趋势。目前主要的平板显示器包括: PDP (Plasma display panel)、LCD( Liquid crystal displays) 、FED( Field emission displays)、 OLED ( Organic light-emittingdiode displays )以及投影显示技术(CRT、LCD、LCOS、DLP)等。
EPD是一种电泳显示技术。
特点
又称电泳显示器,是类纸式显示器较早发展的显示技术,是利用有颜色的带电球,藉由外加电场,在液态环境中移动,呈现不同颜色的显示效果,其代表厂商包括E-Ink与Sipix。日本Bridgestone所推出的高速响应液态显示器(QR-LPD),其工作原理与EPD相似,只是其成像的物质不是使用带电球,而是由黑白2色的粉末在电场之间移动产生显示效果。另外发展较早的胆固醇液晶(ChLC),是一种结构相似于胆固醇分子的液晶。胆固醇反射式显示器在不加电压时,可存在两种稳定的状态,利用两个状态之间的转换,呈现亮暗态的显示效果。其它还有强诱电性液晶(Ferroelectric Liquid Crystal;FLC)等。
发展前景
电泳显示(Electrophoretic,E-Paper)技术由于结合了普通纸张和电子显示器的优点,是最有可能实现电子纸张产业化的技术。它已从众多显示技术中脱颖而出,成为极具发展潜力的柔性电子显示技术之一。据iSuppli预测,电泳显示全球市场2006年仅仅900万美元,但是预计到2013年将增加到2.47亿美元,年均增长率高达60.5%。该增长的大部分市场在指示标和新颖的直接驱动显示器,另外电子显示卡、柔性电子阅读器、电子纸张和数字签字等产品也将获得应用。
电泳技术及其优势
何为电泳技术?照字面意味着“在一定的电压下可泳动”,其显示的工作原理是靠浸在透明或彩色液体之中的电离子移动,即通过翻转或流动的微粒子来使像素变亮或变暗,并可以被制作在玻璃、金属或塑料衬底上。具体技术是将直径约为1mm的二氧化钛粒子被散布在碳氢油中,黑色染料、表面活性剂以及使粒子带电的电荷控制剂也被加到碳氢油中;这种混合物被放置在两块间距为10—100mm的平行导电板之间,当对两块导电板加电压时,这些粒子会以电泳的方式从所在的薄板迁移到带有相反电荷的薄板上。当粒子位于显示器的正面(显示面)时,显示屏为白色,这是因为光通过二氧化钛粒子散射回阅读者一方;当粒子位于显示器背面时,显示器为黑色,这是因为彩色染料吸收了入射光。如果将背面的电极分成多个微小的图像元素(像素),通过对显示器的每个区域加上适当的电压来产生反射区和吸收区图案,即可形成图像。
电泳技术具有几大优势。一是能耗低。由于具有双稳定性,在电源被关闭之后,仍然在显示器上将图像保留几天或几个月。二是电泳技术生产的显示器属于反射型,因此具有良好的日光可读性,同样也可以跟前面或侧面的光线结合在一起,用于黑暗环境。三是具有低生产成本的潜力,因为该技术不需要严格的封装,并且采用溶液处理技术如印刷是可行的。四是电泳显示器以形状因子灵活为特色,容许它们被制造在塑料、金属或玻璃表面上,所以它是柔性显示技术的最佳选择。
电泳技术研发与生产企业
投入电泳技术开发的企业有美国E—Ink和SiPix公司、英国Plastic Logic、荷兰飞利浦旗下Polymer Vision、日本Bridgestone、Hitachi、Seiko Epson、南韩三星电子与乐金飞利浦(LPL)等厂商。
E-Ink公司在产品开发方面走在最前面。2004年E-Ink公司与索尼公司和飞利浦公司联合于推出电泳显示电子书,在欧洲与德国的Vossloh公司联合推出了电子纸信息显示屏,与韩国的Neolux公司联合推出了电子纸式广告屏。SiPix公司和日本的Bridgestone公司联合展示了一些电泳显示屏样屏,但还没有产品推出。
2007年E—Ink与Seiko合作推出了可弯曲的手表外,E—Ink与Sony、大陆金科、台湾eREAD等公司合作推出了电子书;诺基亚发布了概念手机Nokia888;香港o.d.m.公司推出柔性手表、数字卷标等产品;三星电子与LPL则在电泳显示介质上加装彩色滤光片,形成彩色化,不过也因为增加了彩色滤光片,让其推出的产品因反射率降低而看来亮度有些暗淡。荷兰Polymer Vision积极投入电子纸与全彩柔性显示器产品的技术开发,已在英国设立生产厂,预计在2007年底可开始正式量产,届时并将推出全球首款折迭式电子书。
各公司在电泳技术方面略有差异。E—Ink采用的是微结构(Micro Structure)属于微胶囊(Microcapsules),每个显示元素的大小不均且排列零散,因采用黑白双粒子,光反射率较佳是其优点,可达到约35%~40%左右,阅读时的感觉更贴近真正的纸张,缺点则是不够坚固强韧,无法承受重压。而SiPix公司采用的微结构则是专利的微杯数组(Microcup—Array),显示元素大小一致并以数组方式排列整齐,具有较佳的机械与电气特性,承受重压也不会损坏,缺点则是光反射率稍差,约可达到28%。由于在技术上采用的微结构不同,连带也影响到制程的选择。有关专家指出:SiPix的微杯数组结构最大好处,在于可以使用连续滚动条式(Roll to Roll;R2R)的制程可实现大批量产,生产成本较低;反观E—Ink的微胶囊结构由于不够坚固,因此无法实行以压印方式生产的R2R制程,只能以较高的成本喷墨方式制造生产。
面临的技术难题
一是响应速度比较慢。因为电泳技术依赖于粒子的运动,用于显示的开关时间非常长,长达几百毫秒,这个速度对视频应用是不够的。用于电泳显示的使开关时间达到几十毫秒的更快的材料正在开发之中。
二是显示的双稳态、以及转换速度慢,也影响了其连续显示色彩的性能。一些电泳显示器在两种色彩之间切换,如果彩色显示还需要一个彩色滤光片。该技术的驱动器正因双稳定性问题而面临挑战,双稳定性对显示有利,但它也给带来了挑战,因为它需要采用一种独立的驱动器架构,从而导致显示器的成本上升。
三是制造工艺复杂,对材料要求高,成本较高。
我国电泳显示技术发展现状
我国电泳显示研究起步晚,但进步很快,在材料研究及其应用基础研究方面有基础,并已有企业在积极开拓相关产品的研发。例如中山大学和广州奥示科技有限公司合作,研制出黑白、红绿蓝彩色三原色电子墨水,并研制出了柔性显示屏,制作出了彩色三原色的显示屏。国内与国外的技术差距主要在显示屏、材料和功能产品方面。我国企业从发展自主知识产权的平板显示屏制作技术和产品出发,利用自主开发的微胶囊电泳显示材料和超薄平板显示器件结构,开展电子墨水超薄平板显示器件产业化关键技术攻关,研制出了类纸式信息显示屏,实现电泳平板显示器件产品化。我国台湾工研院也已锁定 柔性显示为未来几年的发展重点,并且正与SiPix进行相关技术合作。
瞄准未来市场,研究未来产业发展,开发新技术,超前谋划,是当前我国显示产业持续发展的重中之重的工作。2100433B
MVA(Multi-domain Vertical Alignment)面板是利用突出物使液晶静止时并非传统的直立式,而是偏向某一个角度静止。
多畴垂直配向
MVA(Multi-domain Vertical Alignment)面板是利用突出物使液晶静止时并非传统的直立式,而是偏向某一个角度静止;当施加电压让液晶分子改变成水平以让背光通过则更为快速,这样便可以大幅度缩短显示时间,也因为突出物改变液晶20ms以内。分子配向,让视野角度更为宽广。在视角的增加上可达160度以上,反应时间短。
MVA面板技术是日本富士通转让给台湾奇美和友达两家公司的。金融危机发生后,广角面板生产企业都遇到了危机,台湾奇美友达感觉MVA面板生产成本高,显示器利润低,所以停止给显示器厂家供货。而韩国三星和LG则非常有市场头脑,推出了低成本版的C-PVA和E-IPS,用价格和TN差别不大的低成本广角面板一举占领了过去MVA的市场。台湾人把市场拱手相让,只能够怪他们自己了。唯一让消费者不爽就是市场上买不到新MVA面板显示器了。