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厌氧培养(anaerobic culture)指把微生物置于与分子态氧隔绝状态下所进行的培养,适用于兼性厌氧菌和专性厌氧菌。
厌氧培养--微生物厌氧培养
1.可利用厌氧产气袋法进行厌氧培养。
规格2.5L的产气袋只能将2.5L容积内的氧气完全吸收,转化成二氧化碳,同理,3,5L的产气袋能吸收3.5L容积的氧气。微需要产气袋和二氧化碳产气袋亦是如此,为达到相应的氧气浓度和二氧化碳浓度,不仅容积要固定,放置的培养物数量也基本要装满,在出厂前都根据计算设定好了的,所以,培养也需要在设定的条件下进行。
日本三菱的厌氧培养罐有两种规格:2.5L(13.5*19.7*9.5cm,容纳12只9cm标准培养皿),配套使用1只2.5L规格的厌氧产气袋;7.0L(21.3*28.0*11.2cm,容纳42只9cm标准培养皿),配套使用3只2.5L规格的厌氧产气袋或者2只3.5L的厌氧产气袋。两种都是长方体,原厂的产气袋培养后不会产生负压,直接可以打开,所以不需要泄压孔。
2.厌氧袋(Bio-bag)即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气,内装气体发生管(有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿)、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后,尽量挤出袋内空气,然后密封袋口。先折断气体发生管,后折断美兰指示剂管,命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态,可以孵育。
3.厌氧手套箱(Anaerobie glove box)是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱,箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板,板上装有两个手套,可通过手套在箱内进行操作,故名。箱侧有一交换室,具有内外二门,内门通箱内先关着。欲放物入箱,先打开外门,放入交换室,关上外门进行抽气和换气(H2,CO2,N2)达到厌氧状态,然后手伸入手套把交换室内门打开,将物品移入箱内,关上内门。箱内保持厌氧状态,也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度,本身是孵箱或孵箱即附在其内,还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落,这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究,大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。
由于目的不同而有不同的培养方法,可分为以下几大类:
(1)与空气隔绝或尽量少接触空气的培养法:在三角瓶瓶颈以下装满液体培养基,通过煮沸把溶解的空气赶出后,立即冷却进行细菌接种。由于发酵而产生H2和CO2时,就可进一步确认是厌氧细菌。另外,把琼脂培养基加入普通试管约10厘米高度进行穿刺培养,或移植于液体培养基和固体斜面培养基上以后,再加一层液体石腊或矿物油,用这些方法可防止与空气接触。
(2)除掉空气的方法:把微生物装入耐压容器中进行真空培养,或充满二氧化碳、氢气、氮气、氩气等。这些气体可把事先混入的微量氧气除掉。在氢存在时,可用置换后飞溅火花等方法来除掉残存的氧气
(3)去氧的方法:使用碱性邻苯 三酚(pyrogallol) 、黄磷、金属铬和稀硫酸进行化学除氧,或使用好氧细菌及发芽的种子,使通过呼吸而消耗掉氧气。
(4)在培养基中加入还原剂(如0.1%的巯基乙酸钠盐,0.01%的硫化钠等)。以上各种方法进行适当组合就能进一步确认厌氧细菌。为了确定厌氧性,可在碱性条件下加入葡萄糖并加热,与配制的还原型次甲蓝(美蓝)溶液一起加入,保持脱色状态即可。
AAO污泥一起培养的方法,厌氧污泥怎么培养好好看看就知道了。1、联系、引进足够的焦化废水处理工程产生的剩余污泥作为接种污泥。2、在厌氧、缺氧和好氧池中通入约1/2池深的稀释水(或将前期充水调试...
厌氧污泥应该是统称吧,可以是悬浮的絮状污泥,附着在固体上的生物膜污泥或颗粒污泥。厌氧颗粒污泥最早由Gatze Lettinga发现于UASB系统中,反应器启动几周后发现形成直径为0.5mm的灰白色颗粒...
厌氧-好氧法除磷,厌氧释放磷是为了好氧吸收磷???厌氧池的聚磷菌会流到好氧池么?
释放了磷的聚磷菌是要流向好氧池的。 厌氧-好氧生化除磷工艺流程:二沉池活性污泥中的聚磷菌首先回流到厌氧池,并与原水混合进行释磷反应,然后流入好氧池,在好氧池超量吸收磷,水中的磷就被固定在细胞内了,再流...
膜过滤器培养物的厌氧培养改善了娱乐水域中粪便大肠菌类的检测
膜过滤器培养物的厌氧培养大大改善了娱乐海滩表层水样中粪便大肠菌类的检测。与标准的需氧培养相反,厌氧培养可以抑制掩蔽物即非大肠菌的过度生长,而不会增加粪便大肠菌类的回收率。由于膜过滤器具有使用方便,适合于处理大体积的样品,操作精确以及能迅速获得结果等一系列特点,因而选择其作为监测娱乐水域水质的一种方法。对天然的水而言,由于非粪便大肠菌的背景密度较
好氧堆肥和厌氧堆肥技术
用于处理城市生活垃圾的堆肥系统有许多种。按生物发酵的方式可分为好氧堆肥和厌 氧堆肥。 1.好氧堆肥。好氧分解过程一般在有氧和有水的情况下产生,它的形成如下所示: 有机物质 +好氧菌 +氧气 +水→二氧化碳 +水(蒸气状态) +硝酸盐 +硫酸盐 +氧化物 这种反应过程无任何有害物质产生, 尽管没有一种生物分解是无味的, 但经过正确处理 的好氧发酵所产生的气味很小。它与传统的卫生填埋相比,将厌氧消化过程由几年缩短到 20 天以内,好氧堆肥处理具有过程可控制、易操作、降解快、资源化效果好、可以处理混 合垃圾、 运行费用低等特点。 根据堆肥供氧方式和物料流动形式, 目前国外常用的生活垃圾 堆肥系统可分为以下几类。 ①自然通风静态堆肥。 这是一种最简单的堆肥方式, 就是将准备的物料在一块地上, 堆 高在 2 米左右, 料堆形状一般是长条状, 也可以结合场地条件堆成其他形状。 这种堆肥方式 与敞开式自
又称McIntash-1} ilde,氏厌氧瓶}Mclntosh andFildex' anaerobic jar),由一个带有密封气体的圆形扁平金属盖子的坚固的圆柱形玻璃(或金属)室组成。堵养基等放人瓶内,扭紧盖子通过盖上两个针阀中的一个,用真空泵把瓶抽空,关闭底阀。另一个针阀上联一个充满氢的橡皮囊,在大气压下打开针阿,充进氢气,然后关闭针阀。抽气和进气可连续进行几次。盖的内侧接有纱布囊,内装催化剂-包有把衣的氧化铝小球,以促进氢和剩一F的痕量氧之间的化合。厌氧培养瓶常联有侧臂,臂上有一个小而厚的玻璃容器与瓶的内部相通,装有厌氧生活指示剂。
作为土壤氮素循环重要环节的反硝化已经被证实能与多环芳烃(PAHs)的代谢相偶联。因此,研究土壤反硝化过程对PAHs响应及反其与PAHs代谢相偶联的机制具有重要意义。本项目以具有50多年油气开发史的油田区土壤为研究对象,研究土壤微生物对PAHs污染的响应机制。通过添加电子受体的厌氧培养、富集培养及添加硝化抑制剂(DMPP)的室内培养实验,进一步探讨典型PAHs的降解与土壤反硝化微生物活性及丰度之间的关系,探究土壤PAHs反硝化降解的微生物机制。结果表明,该土壤中,仅细菌多样性与PAHs污染呈显著负相关,PAHs能显著影响土壤细菌及真菌群落组成,而古菌对PAHs污染不敏感。该区域土壤中含有bssA(benzylsuccinate synthase gene)基因的主要类群与Geobacter、Thauera和Azoarcus具有较近的亲缘关系,可通过硝酸盐、硫酸盐及铁还原代谢过程降解土壤PAHs。土壤nirK及nirS基因的丰度均与土壤PAHs含量呈显著负相关(nirK: R2 = 0.54, P < 0.05; nirS: R2 = 0.58, P < 0.05),但nirS型假单胞菌的丰度与土壤PAHs含量呈正相关,表明该菌属可能在土壤PAHs的反硝化代谢中起到重要作用。添加硝酸根能增强土壤的反硝化活性,但对土壤芘和蒽的厌氧降解均无显著的促进作用,同时添加硝酸根和硫酸根能够显著促进土壤芘的厌氧降解。芘对土壤细菌群落结构无显著影响,而蒽能明显改变土壤细菌的群落组成。获取到能够在反硝化条件下有效降解萘和菲的富集菌群,它们对萘和菲的降解率均接近50%。两种富集物中的优势菌属均含有Pseudomonas,再次表明该菌在土壤PAHs的反硝化代谢中具备重要的潜在作用。对富集培养液中萘降解过程中各物质量变化的研究表明,反硝化过程中NO3-还原和随后的NO2-还原过程均能与萘的降解相偶联。在菲污染土壤中,DMPP可以通过抑制AOB(ammonia-oxidizing bacteria)的生长来减弱土壤氨氧化活性,DMPP可显著抑制不添加尿素处理中菲的降解,且能抑制土壤中反硝化相关功能基因的丰度,间接证实反硝化过程可能在土壤菲降解中的作用。本项目的研究结果将有助于全面认识反硝化过程对土壤PAHs污染的响应机制,并为PAHs污染的土壤修复提供一定的理论依据。
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