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RT-PCR技术

RT- PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction）即逆转录PCR，是将RNA的逆转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增反应（PCR）相结合的技术。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞/组织中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列等。

RT-PCR技术基本信息

中文名称RT- PCR
外文名称Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction
别名逆转录PCR
特点灵敏而且用途广泛
本质聚合酶链式扩增反应
作用检测细胞组织中基因表达水平

RT-PCR技术引物选择

随机引物 适用于长的或具有发卡结构的RNA。适用于rRNA、mRNA、tRNA 等所有RNA的反转录反应。主要用于单一模板的RT-PCR反应。 OligodT 适用于具有PolyA尾巴的RNA。(原核生物的RNA、真核生物的 Oligo dT rRNA和tRNA不具有PolyA尾巴。)由于Oligo dT要结合到PolyA 尾巴上，所以对RNA样品的质量要求较高，即使有少量降解也会使全长cDNA合成量大大减少。 基因特异性引物 与模板序列互补的引物，适用于目的序列已知的情况。

RT-PCR技术造价信息

市场价
信息价
询价

收费技术柜

规格型号：
接口板、空气开关、避雷器、布线架、机柜等
价格行情：
材料单位：
套
材料品牌：
材料税率：
13%
供应商：
深圳市金溢科技股份有限公司
报价时间：
2022-12-06

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收费技术柜

规格型号：
接口板、空气开关、避雷器、布线架、机柜等
价格行情：
材料单位：
套
材料品牌：
材料税率：
13%
供应商：
广州滕浩电子科技有限公司
报价时间：
2022-12-06

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全光谱筒灯(罗化独家技术让自然光在家里点亮)

规格型号：
功率:7W/9W/12W
价格行情：
材料单位：
个
材料品牌：
罗化光源
材料税率：
13%
供应商：
深圳市罗化光源有限公司
报价时间：
2022-12-06

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远距无线模块(配NB-IOT技术小口径水表)

规格型号：
NWM-HRI(配NB-IOT技术小口径水表)
价格行情：
材料单位：
台
材料品牌：
宁波
材料税率：
13%
供应商：
宁波水表股份有限公司
报价时间：
2022-12-06

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收费技术柜

规格型号：
接口板、空气开关、避雷器、布线架、机柜等
价格行情：
材料单位：
套
材料品牌：
材料税率：
13%
供应商：
广州滕浩电子科技有限公司
报价时间：
2022-12-06

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技术工日

规格型号：
价格行情：
材料单位：
工日
材料税率：
地区时间：
深圳市2022年11月信息价
所属行业：
建筑工程
备注说明：

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技术工日

规格型号：
价格行情：
材料单位：
工日
材料税率：
地区时间：
深圳市2022年10月信息价
所属行业：
建筑工程
备注说明：

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技术工日

规格型号：
价格行情：
材料单位：
工日
材料税率：
地区时间：
深圳市2022年6月信息价
所属行业：
建筑工程
备注说明：

查看价格

技术工日

规格型号：
价格行情：
材料单位：
工日
材料税率：
地区时间：
深圳市2022年5月信息价
所属行业：
建筑工程
备注说明：

查看价格

技术工日

规格型号：
价格行情：
材料单位：
工日
材料税率：
地区时间：
深圳市2022年3月信息价
所属行业：
建筑工程
备注说明：

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PCR仪

规格型号：
梯度 MG96G 型
需求量：
2台
报价数：
1
材料品牌：
材料档次：
普通
费用说明：
不含税费 | 含运费
询价时间：
2015-12-16

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PCR仪

规格型号：
中文彩屏L 系列 MGL48+型
需求量：
2台
报价数：
1
材料品牌：
材料档次：
普通
费用说明：
含税费 | 不含运费
询价时间：
2015-11-03

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PCR仪

规格型号：
中文彩屏L 系列 MGL48型
需求量：
8台
报价数：
1
材料品牌：
材料档次：
普通
费用说明：
不含税费 | 不含运费
询价时间：
2015-08-12

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PCR仪

规格型号：
普教系列 F 96G 型
需求量：
2台
报价数：
1
材料品牌：
材料档次：
普通
费用说明：
含税费 | 不含运费
询价时间：
2015-04-30

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PCR仪

规格型号：
普教系列 F 96+ 型
需求量：
10台
报价数：
1
材料品牌：
材料档次：
普通
费用说明：
不含税费 | 含运费
询价时间：
2015-11-18

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RT-PCR技术影响因素

RT-PCR反应受多个因素影响，如硫酸镁的浓度, 引物退火的温度，扩增的循环数等。 ◇建议选择0.5-3.0 mM (相差0.5 mM)的硫酸镁作初步实验。 ◇对于具有较高Tm的引物，增加退火和延伸时的温度对反应有利。较高的温度有利于减少非特异的引物结合，因而提高特异产物的得率。 ◇大多数目标RNA经40轮PCR反应就能观察到。但如果目标RNA太稀少，或者只有很少的起始材料，有必要增加扩增的次数到45-50次。

RT-PCR技术简介

RT- PCR首先经反转录酶的作用以RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平、细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组 DNA的污染。 用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT 及基因特异性引物中的一种。对于短的不具有发卡结构的真核细胞mRNA，三种都可。

RT-PCR技术常见问题

实时荧光定量PCR仪国产有哪些,价格及相关技术参数?

BiosaferPCR仪参数参考：1、样品台：标准模块：96×0.2ml+77×0.5ml混合模块；可另选384well模块A；96*0.2mL模块B;54*0.5mL模块C2、温度范围：0℃—99℃...
PCR仪如何设置

1、按 PCR 仪正面左下角电源开关，启动 PCR 仪。2、放 PCR 离心管，先把顶盖向上扳，再往前推，露出放样孔，PCR 管放入前应加好反应体系各组分，再放入 PCR 离心管。3、反向重复第二步骤...
现代技术与传统技术的比较

人类进行通信的历史已很悠久。早在远古时期，人们就通过简单的语言、壁画等方式交换信息。千百年来，人们一直在用语言、图符、钟鼓、烟火、竹简、纸书等传递信息，古代人的烽火狼烟、飞鸽传信、驿马邮递就是这方面的...

RT-PCR技术操作流程

1.从细胞或特定组织中提取总RNA; 2.逆转录实验; 3.扩增内参和目的基因并比较基因表达差异。

RT-PCR技术文献

利用RT-PCR技术检测吊瓜病毒种类的研究

利用RT-PCR技术检测吊瓜病毒种类的研究

利用RT-PCR技术检测吊瓜病毒种类的研究

格式：pdf

大小：268KB

页数： 4页

小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaicvirus,WMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、南瓜花叶病毒(Squash mosaic virus,SqMV)和番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)是危害葫芦科作物最严重、最广泛的5种病毒。根据已知的5种病毒序列设计特异性引物,对感染病毒的吊瓜总RNA进行RT-PCR扩增。结果表明长兴吊瓜的病毒种类主要为PRSV,感染率为100%,无复合病毒感染。吊瓜植株不同取样部位(茎尖、卷须、嫩叶、茎、花、子房、老叶等)的RT-PCR表明老叶是较好的病毒检测取样部位,而嫩叶是吊瓜脱毒最佳的外植体取样部位。对茎尖的PRSV表达量高过幼叶的原因也进行了分析,认为可能是病毒的表达量与植株的代谢强度有关。

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GI和GII型诺如病毒双重荧光RT-PCR法检测

GI和GII型诺如病毒双重荧光RT-PCR法检测

GI和GII型诺如病毒双重荧光RT-PCR法检测

格式：pdf

大小：268KB

页数：未知

目的建立应用Allglo探针同时检测GI和GII型诺如病毒的双重荧光反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法。方法设计针对GI和GII型诺如病毒开放阅读框架ORFl及ORF2为目的基因的引物和Allglo探针，优化最佳反应条件，建立一步法荧光RT-PCR快速检测反应体系；对该方法的特异性、抗干扰性、灵敏度进行评估，对96份临床粪便标本进行检测、测序分析。结果该方法特异性强，与轮状病毒、扎如病毒、星状病毒、腺病毒同时检测无交叉反应；同一体系下GI或GII型诺如病毒相互之间没有干扰；最低检测限均为10 copies／μL；对96份临床粪便标本进行检测，结果与单重荧光RT-PCR方法符合率100％，且测序结果显示目标序列正确。结论本研究建立的Allglo探针法检测GI和GII型诺如病毒技术特异性好，灵敏度高，可用于感染性腹泻暴发中诺如病毒的快速筛查。

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加固技术技术种类

加大截面加固技术，柱外包(粘)型钢加固技术 外粘碳纤维布加固技术，植筋加固技术 托换加固技术，无损开孔成洞加固技术 微细、深层裂缝灌浆加固改造技术 房屋结构纠偏及地基、基础加固技术 外贴钢板加固技术 同华特种加固工程案例分类----建筑加固改造 梁板柱墙的碳纤维、钢板及其他高强纤维粘贴技术; 梁柱钢构套加固技术; 构件加大截面法技术 喷射钢丝(筋)砼技术 高强钢丝(线)网片聚合砂浆加固技术 楼房加层扩建改造技术 砖混结构去除承重墙大开间技术 框架梁柱去除大开间技术 剪力墙、梁、柱、板开洞切割技术 裂缝灌浆技术 钢筋植筋技术 新旧混凝土界面处理技术 火灾、震后加固技术 抗震加固、隔震技术 无损切割技术 粘贴钢板加固法，是指用胶黏剂将钢板粘贴在构件外部的一种加固方法。该法在建筑，桥梁等工程的加固、补强、修复中的应用较为广泛。 原理 用粘结剂粘贴钢板补强、加固的钢筋混凝土结构构件，能大大提高其原设计承载力和抗破坏能力。这是因为粘贴钢板后，提高了原结构构件的配筋量，相应就提高了结构构件的抗拉、抗弯、抗剪等方面的力学性能，而这些性能是靠结构胶粘剂的良好粘结性能，把钢板与混凝土牢固地粘结在一起，形成整体，有效地传递应力，共同工作来保证的。 适用范围 1、适用于承受静力作用的一般受弯及受拉构件。 2、使用环境温度不超过5~60℃，相对湿度不大于70%及无化学腐蚀的使用条件为限，否则应采取有效的防护措施。 3、当构件混凝上强度等级低于Cl5 时，不宜采用本法加固 施工工艺 粘贴面处理 → 加压固定及卸荷系统准备(根据实际情况和设计要求，卸荷步骤有时省去) →胶粘剂配制 →涂胶和粘贴 → 固化、卸加压固定系统 → 检验 → 维护

物流技术技术概述

表1-1物流技术分类表 物流技术硬技术材料：集装材料、包装材料等机械：装卸机械、包装机械、运输机械等 设施：仓库、车站、港口、机场、铁路、装载、吊装设备等 软技术计划：对流通形态与硬技术进行规划研究与改进的工作 运用：对运输工具的选择使用、装卸方法、库存管理、劳务管理 评价：成本计算等 物流技术与生产技术是比较容易混淆的，下面我们看看它们的区别，通过对比更准确地把握物流技术的概念。 表1-2物流技术与生产技术对比表 生产技术物流技术 为社会提供有形物质为社会提供无形服务 直接与科学技术新动向相适应间接地被动地适应多样化需求

监测技术监测技术概述

监测技术这里着重介绍环境监测中污染物的测试技术。如空气检测，水质检测。

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