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2.SRB检测的操作步骤
1)细胞固定:药物作用时间终点时,每孔加入50μL4℃预冷的TCA溶液(30%,w/v)固定细胞,TCA溶液的终浓度为10%。静置5 min移入4℃冰箱中固定1 h,取出用去离子水冲洗5遍,室温晾干。
2)染色:待96孔板室温下晾干后,每孔加入0.4%(w/v)的SRB染液(1%的乙酸配制)70μL,染色30 min后倒掉染液,用1%(v/v)乙酸冲洗4次,去除未结合的染料,室温晾干。
3)检测:用100μL非缓冲Tris-base碱液(10mM,pH=10.5)溶解与细胞蛋白结合的染料,水平摇床上振荡20min,采用酶标仪540nm处测定光吸收值。操作中,应注意洗除染料时操作需迅速,避免用移液器吸取液体,防止动作过慢造成与细胞蛋白结合的染料解吸附。
1.SRB检测方法的原理
磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B,SRB)比色法,主要用来检测细胞增殖情况。SRB是一种粉红色阴离子染料,易溶于水,在酸性条件下可特异性地与细胞内组成蛋白质的碱性氨基酸结合;在540 nm波长下产生吸收峰,吸光值与细胞量成线性正相关,故可用作细胞数的定量检测。SRB染色后不会像MTT法那样很容易变色,细胞固定染色后在96孔板中可以放置较长时间,因而受测定时间的影响较小。用Tris-base溶液溶解的SRB也可稳定较长时间。因此不同时间点固定的96孔细胞培养板可在同一时间测定,测定的吸光值结果不会受到明显影响。吸光值与SRB浓度作图时,在OD单位1.5-2.0以下为线性,当超出线形范围时,最好稀释后重新读数。虽然SRB法比其他检测方法操作步骤繁琐,但是由于时间可以自己掌握,不受限制,因此适用于高通量筛选。
3.SRB检测的计算公式
根据美国国立癌症研究所(National Cancer Institute,NCI)关于SRB检测的介绍,细胞增殖百分率的计算存在以下两种情况:
1)Tx-T0>0,
PG=100×(Tx-T0)/(C-T0)
2)Tx-T0<0,
PG=100×(Tx-T0)/T0
其中,
T0:药物作用前的细胞经过固定、染色后测得平均吸光值;
C:培养基中加有等体积的DMSO,没有药物作用的阴性对照的平均吸光值(阴性对照);
Tx:药物作用终点时细胞经过固定、染色后测得平均吸光值。
PG即Percentage Growth,是指药物作用的样品孔与阴性对照孔中细胞增殖量的百分率。
全站仪操作步骤
全站仪操作步骤 1.架好仪器,对中整平。 2.开机→按 MENU键→F3(存储管理)→ F4(翻页)→ F1(输 入坐标)→ F1(输入)输入一个文件名,如: File ,回车后 输入点名如 A,回车后输入坐标( N,E,Z),输入完后回车 输入第二个点名如 B,回车后输入坐标( N,E,Z),回车后 进入输第三个点界面,这时按两次 ESC退出到“数据采集” 界面。 3.按 F1(数据采集)→ F1(输入)输入刚才的文件名 File , →F1(输入测站点)→ F4(测站)→ F2(调用)找到 A,回 车,检查屏幕显示的坐标是否正确,是则按 F3(是)→输入 仪高(如 1.5 米),按 F3(记录)→ F3(是)。这时返回到 了数据采集界面。 4.全站仪照准后视点, 按 F2(输入后视点) →F4(后视)→F2 (调用) 找到 B点,F4(回车) →F3(是)→F3(测量)→ F1 (角度
广联达操作步骤
广联达操作步骤: 新建工程——新建楼层——新建轴网——绘图输 入——汇总查量 新建工程: 1、 第一步工程名称 注意计算规则一定要选择正确, 其他根据不同省份修改,福建省选择不计算损耗 和全统 2000 2、 第二步工程信息 黑色字体只起到标示作用, 只需 要修改蓝色字体的信息,详细看图纸。 3、 第四步比重设置 当图纸中所有的直径为 6的钢 筋都为一级钢筋时要把的比重复制到 6的比重 内。 新建楼层: 1、 插入楼层:鼠标点击到基础层或者地下层的时候 再点击插入楼层是新建地下楼层,鼠标点击到首 层或者其他地上楼层时是新建地上楼层。 2、 只有楼层名称、层高、首层底标高等白色底纹的 能进行修改。 3、 楼层钢筋设置主要修改抗震等级(一个工程出现 多个抗震等级时)、混凝土标号、保护层厚度。 新建轴网: 1、一般都是以柱平面图的轴网为准。 2、操作步骤:新建轴网—定义属性 (上下开间或左右
型号:SRB系列 篮式过滤器
SRB系列篮式过滤器 外形尺寸图
SRB系列篮式过滤器是除去液体中含有少量固形物的小型设备,可保护压缩机、泵和其它设备及仪表等正常工作;也是提高产品纯度、净化气体的小型设备。因此,广泛应用于石油、化工、化纤、医药、食品等工业。SRB系列篮式过滤器有壳体、排污盖、滤芯、滤网、螺栓等组成。网眼总面积是入口管道截面积的3-4倍,压差为0.05-0.15,压力在设计有不同。SRB系列篮式过滤器共有四种形式:直通平底SRB系列篮式过滤器;直通弧底SRB系列篮式过滤器;高低接管平底SRB系列篮式过滤器;高低接管弧底SRB系列篮式过滤器;订货时必须详细注明。
施迈赛安全继电器模块SRB系列用来监控所有带机电开关的安全防护装置,比如紧急停止开关、带或不带锁定的门开关、安全地毯等。这些模块内部带有电压电流限制设计,也适合光电式和安全磁开关的监控。
SRB 219IT 带诊断显示的多功能安全继电器模块带诊断显示的多功能安全继电器模块 适合连接到无源输出信号处理,比如:紧急停止指令装置,安全位置开关,门锁开关 适合安全磁开关输出信号评估 2 安全触点, STOP 0;1 安全触点, STOP 1 (可调整的 1 ... 30 s)适合连接到有源信号输出(AOPDs),比如安全光栅/光幕 1 + 8 信号输出SRB 308IT 带诊断显示的多功能安全继电器模块带诊断显示的多功能安全继电器模块 适合连接到无源输出信号处理,比如:紧急停止指令装置,安全位置开关,门锁开关 适合连接到有源信号输出(AOPDs),比如安全光栅/光幕适合安全磁开关输出信号评估 3 安全触点, STOP 0 2 + 6 信号输出
施迈赛安全继电器模块型号:SRB 031LCSRB 031MCSRB 200X2SRB 202C.SRB 206SQSRB 206STSRB 207ANSRB 207AN/1SRB 219ITSRB 219IT-24VSRB 220XV2SRB 301ANSRB 301LCSRB 301LC/BSRB 301MCSRB 301SQSRB 301STSRB 301ST-230VSRB 301X1SRB 301X4SRB 302X3SRB 304STSRB 308ITSRB 320XV3SRB 324STSRB 400C.SRB 504STSRB 301HC/RSRB 301HC/TSRB 402NESRB 301MASRB 400NESRB201LCSRB 211LTSRB 301LC/8SRB 324LT
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