马铃薯由于具有高产、生育期短、适应性广、抗灾害能力强、营养丰富、用途广泛等优势，在世界范围内广泛种植，已成为世界第四大粮食作物。马铃薯在我国已有400多年的种植历史，目前，中国是世界马铃薯第一大生产国，面积和总产约占世界的1／4，全国有22个省市（市、区）种植马铃薯。我国脱毒种薯的应用面积仅为马铃薯种植面积20﹪左右，而发达国家均为90﹪以上。所以，当务之急是培育出适应市场需要的脱毒种薯，扩大播种面积，提高单产和质量，促进马铃薯产业的发展。
一、为什么要脱毒
影响马铃薯种薯生产的重要因素是马铃薯病毒引起的马铃薯种薯退化问题，解决这问题最有效的方法就是应用脱毒技术。当感染马铃薯的病毒接触，侵入到马铃薯的叶片表面后，经过繁殖就向临近细胞转移，其速度较慢。病毒浓度逐渐增大，转移到韧皮部后通过维管束转移到植株的其它部分。而茎尖分生组织没有维管束，病毒也只有通过细胞间隙的胞间连丝来传递，其速度远没有茎尖分生细胞分裂增殖的快，所以生长点的病毒数量极少。通过切取茎尖组织可获得不带病毒的外植体，进行组织培养，可获得不带病毒的完整植株。
二、材料的选取与消毒
供培养用的茎尖最好取自活跃生长的芽，顶芽的茎尖生长要比腋芽的快，成活率也高。
1 材料的选取。
最好是在马铃薯生长季节选择具有原品种特征特性的单株，收获后对入选的块茎用0.50～1mg/kg的赤霉素浸种20min，然后置于温室内的砂床上或种在无菌的盆土中育芽。管理中应浇水时要直接浇在土壤中，切忌浇在叶片上，以防止水分感染茎尖。对于田间种植的材料还可以切取插条在实验室的营养液中培养，有这些插条的腋芽长成的枝条，要比从田间植株上直接取来的枝条污染少得多。如果直接从田间取材，在切取外植体前要将顶芽或侧芽连同部分叶柄和茎段一起在2％～10％的次氯酸钠溶液中浸泡10～15min。对上述培养的材料待芽长到5cm时剪取芽尖约2～3cm，用镊子剥去易见的叶片后等待消毒。
2 消毒
消毒时先将剥取的材料用纱布包好，并置于自来水下冲洗40min左右，然后在超净工作台内用0.10％～0.20％的氯化汞溶液浸泡8～10min，再用70％的酒精消毒10～20s,最后用无菌水冲洗3～5次，并用消毒后的滤纸吸干材料表面的水分。消毒是否彻底，是否得到脱毒苗的关键环节，因此，一定要按照要求严把消毒质量关，并且操作要小心，避免损伤组织。
三、茎尖剥离
1 培养基的要求
MS+6-BA: (0.5／L)+NAA: (0.1／L)+GA3: (0.1／L)
2 茎尖剥离过程
茎尖剥离要求无菌操作，故做好接种室的消毒时至关重要的。接种室的污染来源主要是空气中的细菌和真菌孢子，因此，剥离前应进行地面的清洁卫生工作，并用75％酒精喷雾降尘，同时用紫外灯照射20min，以减少空气中的病菌，提高脱毒质量。
剥离茎尖一般在超净工作台上进行，需要一解剖镜（8～40x）、解剖针、镊子等。解剖前首先将手和所有工具、超净工作台面等用75％的酒精或新洁尔灭彻底清擦一遍。
解剖。解剖是在双筒解剖镜下进行的，左手拿镊子固定材料，右手同时那解剖针层层剥掉幼叶，直至露出带两个叶原基的生长点时，切下只带一个小叶原基的茎尖，并迅速接种到含激素MS固体培养基上。外植体解剖时必须注意使茎尖暴露的时间越短越好，并在材料下垫一块湿润的无菌滤纸以保持茎尖的新鲜。同时动作要轻微，以免损伤组织。每支试管接种一个茎尖，接完后用橡皮筋扎紧，作好标记，注明材料名称和接种日期。为防止交叉感染，解剖针、镊子等接种工具使用一次后应放入75％酒精中浸泡，然后灼烧放凉备用。
马铃薯茎尖无毒区约0.10～0.30mm，但各种病毒之间存在差异，因此剥离的茎尖大小与茎尖所带病毒的数量有很大关系。茎尖越小，所带病毒越少；茎尖越大，所带病毒越多。但若剥离的茎尖太小，就会降低成活率。故剥离时要根据实际情况选择茎尖的大小。
四、病毒鉴定
对通过茎尖剥离培养的小苗切段繁殖数瓶后，每株的后代留一部分保存，另一部分进行病毒鉴定。鉴定方法有植株直接测定法、血清学方法和电镜法。但血清法灵敏度高，获得检测结果迅速，是目前检测病毒的一种最好方法。用血清法检测后凡呈现阳性反应者全部淘汰，对阴性反应的植株再进行指示植物鉴定。经指示植物鉴定不带病毒的脱毒苗即可供以后扩大繁殖。
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