(1)二甲苯(Ⅰ) 15min
(2) 二甲苯(Ⅱ) 15 min
(3)二甲苯:无水乙醇=1:1 2min
(4) 100%乙醇(Ⅰ) 5min
(5) 100%乙醇(Ⅱ) 5 min
(6) 80%乙醇 5min
(7) 蒸馏水 5 min
(8) 苏木精液染色 5 min
(9) 水洗10 min 或流水冲洗5 min
(10) 1%盐酸乙醇 30s
(11) 水洗 30 s
(12)蒸馏水过洗 5 s
(13) 0.5%伊红液染色 1-3 min
(14) 蒸馏水稍洗 30 s
(15) 80%乙醇稍洗 30 s
(16) 95%乙醇(Ⅰ)1 min
(17) 95%乙醇() 1 min
(18) 无水乙醇 (Ⅰ)3 min
(19)无水乙醇(Ⅱ)3 min
(20)二甲苯(Ⅰ) 3 min
(21)二甲苯(Ⅱ) 3 min
(22)中性树胶封固
(1)冰冻切片固定 10~30 s
(2)稍水洗 1~2 s
(3)苏木精液染色(60℃) 30~60 s
(4)流水洗去苏木精液 5~10 s
(5)1%盐酸乙醇 1~3 s
(6)稍水洗 1~2 s
(7)促蓝液返蓝 5~10 s
(8)流水冲洗 15~30 s
(9)0.5%曙红液染色 30~60 s
(10)蒸馏水稍洗 1~2 s
(11)80%乙醇 1~2 s
(12)95%乙醇 1~2 s
(13)无水乙醇 1~2 s
(14)石炭酸二甲苯 2~3 s
(15)二甲苯(Ⅰ) 2~3 s
(16)二甲苯(Ⅱ) 2~3 s
(17)中性树胶封固。
注:第(14)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇。
染色结果:细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。
切片脱水透明 切片经HE染色后,要彻底脱水透明,才能用中性树胶封盖。如果脱水不彻底,封片后呈白色雾状,镜下观察模糊不清,且容易褪色。切片1-2级无水乙醇脱水,也可使用石炭酸二甲苯进行脱水。石炭酸有较强脱水能力,但长时间可使切片脱色,因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去。