⒈优点:省去脱水、透明的步骤,材料由70%酒精中取出后可直接封固,操作简单,可防止水分含量大的组织在脱水过程中收缩。因此,很多藻类、真菌、苔藓及胚囊材料常用此类封固剂。
缺点:封固后容易失水,引起封固剂干缩或形成结晶,封固不坚固。
⒉主要的含水封固剂
⑴、阿拉伯树胶
配方:
阿拉伯树胶40克,蒸馏水40毫升,甘油20毫升
先将阿拉伯树胶放入水中溶化,然后加入甘油,再加少许石炭酸以防腐。
⑵、甘油明胶封固剂(甘油明胶常用于脂肪染色的冰冻切片)
1)甘油明胶为含水封固剂 , 用于不能使用油溶性封固剂的组织切片。组织切片不必经过脱水、透明等步骤即可封固,因此使用方便。但用含水封固剂封固的切片在梅雨季节,易受真菌侵袭而损坏,所以难以长期保存。其折光率为1.47,是脂肪染色的标准封固剂。
2)配制方法为:取蒸馏水60 mL置于三角烧瓶内,秤取化学纯的明胶l0g放人蒸馏水中,加热融化,再各加化学纯的甘油70mL、苯酚0.25g,不时搅拌,直至溶液混合均匀为止。配制好后装在试剂瓶中.备用,临用前将甘油明胶放入温箱,融化后即可封片。
⑶、Apath糖浆(用于证明淀粉样变的结晶染色法中)
⒈综述
⑴、无水封固剂系将一种树脂(天然或合成的)溶于其天然溶剂或二甲苯内直至呈适当的易 干易凝的流体状以便封固。其粘稠度以便易排除气泡且在盖玻片与切片之间能自由流动 为好,稍稠一点则可避免干燥后在盖玻片下形成空气间隙。中性树胶是很好的封固剂, 不仅折光率(1.52)及色散作用都近似于玻璃,而且在很薄一层时几乎是完全无色透 明。用以封存HE染色的切片则色彩非常鲜艳。干 固后即变硬,能把盖玻片和载玻片紧紧 地粘在一起。仅有的缺点是随着保存时间的延长,树胶逐渐使二甲苯氧化,产生甲苯酸及 邻苯二甲酸能使碱性染料褪色。
⑵、冰冻和火棉胶切片的封固,使用时组织切片必须脱水,透明彻底,使用无水封固剂,不 然片中会出现云雾状混浊,妨碍镜检。
⑶、因酸或碱性封固剂均可引起组织切片的褪色,故宜用中性封固剂。
无水封固剂有中性树胶,大马树脂及人工树脂等。
⑷、封固剂应保存于有色瓶中避免日光照射,并存放于暗处以防酸变。
⒉加拿大树胶
⑴、加拿大树胶的性状:
浅黄至微绿色、粘性、透明、微有荧光的液体。有愉快香气。味苦。露置空气中渐变为固态的非结晶物质。能与苯、氯仿、二甲苯、乙酸乙酯和香柏油等混溶。溶于乙醇、乙醚、松节油和石油醚,不溶于水。相对密度0.987~0.994。折光率(n20D)1.52~1.54。
⑵、用途:
生化研究,镜片及盖玻片胶粘,贴附显微镜标本。用作清漆。加拿大树胶溶于二甲苯后,它的折光率是1.52,接近于玻璃的折光率(1.51),透明度很好,用以封片几乎无色,干后坚硬牢固,可长期保存。因此,它是封片常用的封藏剂。市售的加拿大树脂有浓液体和固体两种。如果是固体,可以在树胶中加入约相当于树胶体积一半量的二甲苯,放在温暖处,时常搅拌,促使树胶溶化。溶化后的较液浓度以胶液能沿玻璃棒一端顺利下流为宜(如果要封藏后使它干燥更快,可用苯代替二甲苯)。
⑶、加拿大树胶在使用和贮存时应注意:
a不能加热,否则树胶立即变成深褐色,影响封片后的观察
b树胶应贮存在棕色瓶内,避光保存
c玻璃瓶口应密闭,以防蒸发凝固
d为了防止树胶变酸,在树胶内加入几小块用二甲苯清洗过的大理石,以中和酸性
⒊达马树胶
为松柏科植物--柳安所分泌的一种白色微带淡黄的半透明树脂。能溶于二甲苯、苯、松 节油、氯仿和250毫升二甲苯中。过滤、待蒸发到100毫升时即可使用。此封固剂的折不 率为1.52,能长期保存中性,封固作用好于加拿大树胶。
⒋一种用松香配制的封固剂
配制方法如下:
松香 12 g
纯酒精 5ml
松节油 5ml