常用的两种铝苏木素溶液有Ehrlich氏溶液和Harris氏溶液。铝苏木素溶液能够把细胞核染成半透明的浅蓝色,在酸性环境下会迅速变成红色。作为媒染剂使用的钾铝硫酸盐在碱性溶液通常结合与氢氧根形成不能溶解的氢氧化铝。 在过量的酸中,氢氧化铝由于缺乏OH-离子而溶解,因此,铝苏木素溶液的酸性溶液变成红色。 在铝苏木素溶液染色时,被染色的部分通常转移到一种碱性溶液中,中和酸并释放氢氧根,形成一个不溶的蓝色铝苏木精复合物。
由于自来水碱性不十分强,通常用每升含有33.5 g NaHCO4和20克的MgSO4,并加入百里香酚兰的溶液代替。使用冷水会减慢染色过程。 实际上,使用在10°C之下的冷水甚至可能导致组织呈现红色。
Ehrlich
1 g 苏木素
100 ml无水乙醇
60 g 明矾(铝钾硫酸盐)
100 ml甘油
100 ml蒸馏水
10 ml冰醋酸(HOAc)
首先,在100 ml无水乙醇中溶解1 g 苏木素,微热。 然后,在100 ml蒸馏水中溶解60 g明矾加入100 ml甘油微热。 第三步,混合二种溶液并且增加10 ml冰醋酸。 然后转移到用棉花轻轻塞住口的烧瓶中,暴露在空气和阳光中几个星期,每天震荡溶液。在这个过程中,苏木素被部分氧化。 最后,把溶液转移到一个封口很严的试剂瓶中在温暖处存放。
染色时,有时需要加入0.3 g碘酸钠。 因为苏木素溶液被氧化,溶液的颜色从紫色将变成深红,而醋酸刺激性气味将变成宜人的芳香。 甘油作为稳定剂并且减速溶液的蒸发。 然而,甘油可以减速染料的成熟,所以可以在最初的制备以后的4到6个星期后加入。
Ehrlich的苏木素溶液染色时,黏多糖物质例如软骨素也被染成蓝色。 染色时间通常是15到40分钟。
Harris
1 g 苏木素
10 ml无水乙醇
20 g 明矾(铝钾硫酸盐)
0.5 g 氧化汞
190 ml蒸馏水
10 ml冰醋酸(HOAc)
首先,在10 ml无水乙醇中溶解1 g 苏木素,微热。 然后,在500 ml烧杯中加入190ml蒸馏水和20 g明矾。 第三步,加入氧化汞,立即插入冷水中迅速降温。要用开口较大的容器,防止加入氧化汞后放出氧气引起爆炸。加入氧化汞后,溶液应该呈现深紫色。加入4%的l冰醋酸能够使对细胞核染色的特异性更强。 最后,把溶液过滤,转移到一个密封的试剂瓶中,立即使用或长期保存。
Harris氏苏木素配方染色被用于细胞核的常规检查和性染色体的检查。染色时间通常是5到20分钟
Cole
1.5 g 苏木素
50 ml1%的碘的95%乙醇溶液
700ml饱和的明矾溶液
250 ml蒸馏水
把苏木素溶解到250ml温的蒸馏水中,加入碘酒,加入明矾溶液,煮沸。
Cole氏苏木素染色溶液使用前要冷却,过滤。染色时间通常是10分钟。
Mayer
比Ehrlich氏苏木素配方灵敏度好,不会或很少会把黏多糖物质染色。
1 g 苏木素
0.2g NaIO3
50g 明矾
1g柠檬酸
50g水合三氯乙醛
1000 ml蒸馏水
把苏木素,明矾,碘酸钠加入1000ml蒸馏水溶解,过夜放置,以便苏木素充分溶解。加入柠檬酸,水合氯醛,煮沸5分钟后冷却。