正白亮氨酸的生产方法主要有提取法、化学合成法、酶催化法、微生物发酵法等。
蛋白质水解法:
氨基酸是蛋白质的组成单位，在酸性条件下，将正白氨酸含量较高的蛋白质水解，得到各种氨基酸的混合物，经分离、纯化、精致等工序获得正白氨酸产品。中国大部分厂家采用蛋白质水解法生产正白氨酸。蛋白质水解法生产正白氨酸的优点是生产设备简单，技术要求不高，并且正白氨酸在蛋白质中的含量较高。但是蛋白质水解法生产的缺点是费时、污染严重、收率低、产品质量得不到保证，大规模生产受到限制。
化学合成法
正白氨酸化学合成法有A . Strecker 。一卤代酸氨解、相转移催化等几种方法。虽然化学合成法原理简单，价格低廉，但操作复杂，反应条件苛刻，产物多，产率不高，并且有的方法涉及到有毒物质。化学合成法得到正白氨酸是消极的。为了得到正白氨酸，必须进行光学异构体的拆分。因此化学合成法很少用于正白氨酸的生产。
酶催化法
酶催化法生产正白氨酸通常是利用转氨酶转氨给。一酮基异己酸生成正白氨酸。将相关的酶和NADH共价结合在膜上，让底物缓缓地经过膜而进行酶催化反应生成正白氨酸。如1981是否能够被解除和解除的效果。获得积累目的产物的突变株最有一效的方法是通过基因突变解除微生物的正常代谢控制。获得突变株常用的几种方法如下:选育营养缺陷型菌株，切断或改变平行代谢途径;选育抗结构类似物突变株解除反馈抑制和阻遏;选育细胞膜通透性突变株，使目的产物分泌到细胞外，使细胞内终产物的浓度达不到引起反馈调节的浓度;应用基因工程、代谢工程的手段有目的改造微生物菌株，使其高浓度合成目的产物。
