方法名称: 醋酸氢化可的松-醋酸氢化可的松的测定-高效液相色谱法

应用范围: 本方法采用高效液相色谱法测定醋酸氢化可的松的含量。

本方法适用于醋酸氢化可的松。

方法原理: 供试品经处理后用流动相溶解并稀释成一定浓度的溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长254nm处检测醋酸氢化可的松的吸收值，计算出其含量。

试剂: 1. 乙腈(色谱纯)

2. 水(色谱纯)

3. 甲醇

仪器设备: 1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按醋酸氢化可的松峰计算一般为6000，醋酸氢化可的松与醋酸可的松的 分离度应大于5.5。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相:乙腈:水= 38 62

2.2 检测波长:254nm

2.3 柱温:室温

试样制备: 1. 对照品溶液的制备

取醋酸氢化可的松11mg，精密称定，置50mL量瓶中，加甲醇适量，超声使溶解，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取2mL，置25mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。

2. 供试品溶液的制备

取本品适量，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1mL中 含0.22mg的溶液，精密量取2mL，置25mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。

操作步骤: 分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长254nm处测定醋酸氢化可的松的吸收值，计算出其含量。