1. RP-HPLC法测定巯基含量

采用色谱柱Kromasil-C18 (250×4.6mm, 5μm)，流动相A(0.1%TFA)和流动相B(甲醇)梯度洗脱:流动相B 40%~80%，0~10min，然后80% B保持5min，流速0.8mL/min，检测波长327nm，得到NTB标准曲线y=3.67059x+0.14123，回收率101.9%，RSD=l.17%，从而建立了一种高灵敏度巯基检测方法。

2. 采用分子荧光光谱法作为反应条件，用反相高效液相色谱梯度洗脱法测定巯基

用OPA、丹酰氯、茚三酮与半胱氨酸反应，测其可见紫外吸收光谱及荧光光谱;在不同PH、温度、反应时间条件下，用OPA与半胱氨酸反应测其荧光度;分别吸收0.1mmol/L半胱氨酸溶液0、20、40、60、80、100 μl，各加入10 μlH2O2,室温下反应30min，然后加热蒸干，残渣用200μl OPA衍生液，定容至5 ml，4 min时测其荧光光谱。取pH8.4的硼酸缓冲溶液 5μl，混合10次;加入OPA衍生液2μl，混合进样走HPLC。梯度条件:洗脱液B所占比例0min为0，17min线性增加至60%，17.5min线性增加至100%，20min洗脱结束。激发波长为340nm,荧光检测波长为450nm。

3.柱前衍生高效液相色谱-紫外检测法

以tris(2-carboxylethyl) – phosphine (TCEP)为还原剂，7–fluorbenzo–2–oxa –1,3– diazole– 4-sulfonate(SBD-F)为衍生剂，N-乙酰半胱氨酸为内标，C8色谱柱分离，流动相为甲醇 -磷酸盐缓冲液(pH =3. 0),梯度洗脱 ,385 nm处检测。线性范围为8. 3~1042. 6 μmol/L,最低检测限为 0. 42μmol/L,日内精密度为 1. 67%~1. 86%,日间精密度为 2. 08%~3. 06 %,平均回收率为 98. 1%~103. 2 %。

4. 电化学脱附与荧光技术联用

将样品固定在烷基硫醇自组装膜修饰的金电极表面 ,通过荧光试剂马来酰亚胺与游离巯基反应原位标记 GSH,恒电位条件下脱附电极表面吸附物 ,检测脱附物在 0.1 mol·L.KOH溶液中的荧光强度。