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氯霉素化学发化检测试剂盒检测方法

2018/06/19129 作者:佚名
导读: 试剂盒组成 1、微量测试孔:每条8孔,每板12条2、氯霉素标准溶液:0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05 ppb,1.5ml/瓶3、96孔化学发光板×1块 (包被有偶联抗原)4、标准液×6瓶:(1ml/瓶)0ppb,1ppb,3ppb,9ppb,27ppb,81ppb5、高浓度标准品:(1ml/瓶)1ppm6、酶标记抗体7、显色剂8、2

试剂盒组成

1、微量测试孔:每条8孔,每板12条

2、氯霉素标准溶液:

0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05 ppb,1.5ml/瓶

3、96孔化学发光板×1块 (包被有偶联抗原)

4、标准液×6瓶:(1ml/瓶)

0ppb,1ppb,3ppb,9ppb,27ppb,81ppb

5、高浓度标准品:(1ml/瓶)1ppm

6、酶标记抗体

7、显色剂

8、20×浓缩洗涤液

9、2×浓缩复溶液

使用说明

A、注意事项

1、使用前先将氯霉素标准溶液6瓶,浓缩萃取稀释液,浓缩洗涤液,酶标记物,底物溶液及微量测试孔条置于室温下,回温30分钟。

2、洗涤工作液

用去离子水将20×浓缩洗涤液按1:19体积比进行稀释 3、回温后,取出所需微量测试孔条,将剩余板条立即放回铝箔袋中用胶带封好,置于4o℃保存。

样品制备

1.待测物为组织样本,则依以下方法进行处理

a.取3g样本、4ml蒸馏水与6ml 乙酸乙酯置入离心管中,震荡约5分钟,使其充分混合均匀。

b.离心10分钟(3000rpm),取4ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中,于50℃下氮气吹干(温度请勿超过50oC)。

c.加入1ml萃取稀释液,震荡约10秒钟后备用。

C、操作步骤

本产品的酶标记物与氯霉素标准溶液均直接使用,无需再稀释。

1、于适当微孔中分别加入100mL标准溶液(0,0.05,0.15,0.45,1.35和4.05ppb)。

2、在另外的微孔中加入100mL 已完成前处理的样品溶液。

3、再于每一微孔中另再加入50mL酶标记物。

4、轻敲盘子四周,使其充分混合后于室温下避光静置温育1小时。

5、将微孔中的反应液甩掉,再将洗液加满每一微孔后甩掉,重复洗3次。

6、最后一次甩掉后,在吸水纸上拍干。

7、于每一微孔中加入底物溶液100mL后,轻敲盘子四周,使其充分混合。

8、于室温下避光静置温育20分钟。

9、于每一微孔中加入100mL反应终止液。

10、用化学发光仪于下判读。

D、判定

1. 计算B/B0值。用样品或标准液吸光度值(B)除以零标准吸光度值(B0)再乘以100%。

2. 以B/B0值为纵坐标,以标样浓度的对数值为横坐标,做标准半对数曲线。

3. 根据每个样品的B/B0值就可从曲线上读出相对应样品的浓度。

4. 由于样品经过了预先稀释,因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。

E、标准曲线

F、灵敏度

氯霉素试剂检测盒的平均检测下限为0.05ppb,此浓度之吸光值与阴性标准溶液(0ppb)之吸光值有明显的差异。

G、 特异性

针对以下抗生素进行交叉反应之测试,结果如下:

Chloramphenicol =100%

Chloramphenicol(free base) <0.1%

Gentamycin <0.1%

Tetracycline <0.1%

Penicillin G <0.1%

Sulfamethazine <0.1%

H、再现性

针对氯霉素检测试剂盒精密度测试,重复6次,所得不同浓度标准溶液的吸光值变异系数(%CV).

I、回收率

组织(添加1.0ppb)104~117%

*文章为作者独立观点,不代表造价通立场,除来源是“造价通”外。
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