钻石玫瑰（Rosasp.），蔷薇科蔷薇属多年生花卉，为微型月季的一种，因其花枝短小,花朵如豆扣般大小,故美其名曰“钻石玫瑰”或“袖珍玫瑰”。钻石玫瑰除具有一般月季花容秀美、芳香馥郁、四季常开等特点外,还具有分枝多、株型矮小紧凑、耐寒、耐热、适应性强等优点，是现代城市，绿化不可替代的材料，深受人们的喜爱。目前钻石玫瑰主要靠扦插，繁殖，繁殖率低、速度慢，且后代出现品质降低现象，远远不能满足市场的需求。为此开展了钻石玫瑰组培快繁技术研究,拟用工厂化育苗措施解决常规生产所面临的问题。 1材料与方法
（1）外植体的建立
供试材料采自重庆市园林绿化科学研究所，品种圃从北京引进已栽培驯化2年的钻石玫瑰品种“紫色时代”当年生植株。
剪取优良健壮株当年生枝条中段带侧芽的未木质化或半木质化茎段，用毛刷蘸肥皂水轻轻刷洗后流水冲洗1～2h,再剪成1.0～1.5cm左右带腋芽的茎段，超净台上，将茎段先用70%酒精溶液浸泡30s,，无菌水冲洗2～3次，再置于0.1%升汞溶液中消毒9～12min，然后用无菌水冲洗3～4次,以备接种。
（2）丛生芽的继代增殖培养
将诱导培养基上已萌发的嫩芽切下转接到4种继代培养基中继代增殖。继代培养基分别MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L,MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10mg/L,MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L，MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.20mg/L。每种培养基接种30个嫩芽，接种时单芽茎段长0.5～1.0cm左右,培养3周后统计丛生芽的数量以及高于2cm的芽数（见表2）。
（3）试管苗的生根培养
选取继代培养中生长健壮的丛生芽,剪成1.2～1.5cm长的单芽茎段，转接到生根培养基上。培养基配方为：1/2MS+NAA0.10mg/L，1/2MS+IBA0.1mg/L，1/2MS+NAA0.20mg/L，1/2MS+IBA0.20mg/L，1/2MS+NAA0.50mg/L，1/2MS+IBA0.50mg/L。每种培养基接种30个茎段，接种15天后统计幼苗生根情况。
以上MS培养基中的白砂糖浓度均为30.0g/L，1/2MS培养基中白砂糖浓度为20.0g/L，琼脂均为3.5g/L,pH5.8，培养室温度23（±2）℃，光照强度2000～2500Lx，光照时间10～12h/d。
2结果与分析
（1）离体芽的诱导结果
钻石玫瑰离体芽的诱导较慢，接种4周后离体芽才开始萌动，但芽萌动后的生长情况因培养基内激素浓度的不同而不同。MS+6-BA0.30mg+NAA0.10mg/L培养基丛生芽少，由于6-BA浓度太低，芽分化相对较差，分化率为70%,但丛生芽在培养基中生长健壮；在MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L培养基上,丛生芽相对较少，芽分化率为105%,且丛生芽生长细弱，说明该培养基中6-BA和NAA浓度配比不当；在MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.10mg/L培养由于6-BA浓度过高，离体芽萌动后仅产生愈伤组织，未分化出丛生芽；MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L和MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L两种培养基上,20个离体芽分化出的丛生芽分别为49个和39个，分化率分别达245%和195%,且丛生芽生长健壮。 （2）丛生芽的继代增殖结果
钻石玫瑰在所采用的4种继代增殖培养基上培养3周后，芽的增殖倍数和大于2cm芽的比率存在差异。其中：MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10mg/L和MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L两种培养基上，增殖的丛生芽多，且芽生长健壮，芽的增殖倍数分别为5.67倍和5.2倍，大于2cm的芽占75.29%和71.79%，明显高于其它培养基；在MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L培养基上，芽生长细弱，丛生芽少，增殖倍数仅为2.1倍，大于2cm的芽占18.75%；MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.20mg/L培养基由于6-BA浓度过高，继代芽产生愈伤组织后停止生长分化。，
（3）试管苗生根培养结果
钻石玫瑰在所用的6种培养基上培养15天后统计结果，试管苗的生根率为13.3%～90%，生根数为4～243根，平均根长为0.26～1.5cm。在1/2MS+NAA0.20mg/L、1/2MS+NAA0.50mg/L、1/2MS+IB0.20mg/L、1/2MS+IBA0.50mg/L培养基上，试管苗10d开始生根,生根率分别为60%、23.3%、13.3%和30%，根数分别为90根、14根、4根和27根，平均根长分别为0.35cm、0.26cm、0.6cm和0.45cm，且由于生长素浓度过高，15d后根均变成深褐色，停止生长后慢慢死亡。在1/2MS+IBA0.10mg/L和1/2MS+NAA0.10mg/L培养基上，培养9d开始生根，根系发达,发育良好,生根率达63.3%和90%，平均根数8根和9根，平均根长1.1cm和1.5cm，均明显高于上述4种培养基，且小苗和根长势均良好。重复试验，在设计的6种培养基中，1/2MS+NAA0.10mg/L培养基上生根最好。 （4）生根试管苗的驯化移栽
将生根试管苗放在室外光线明亮的地方，闭瓶炼苗2～3d，再逐渐开瓶炼苗2～3d，让植株经受试管外环境的锻炼后取出试管苗洗净基部粘附的培养基，移植于珍珠岩：腐殖土：炉杂为1：3：3的基质中，浇浓度为0.8g/kg多菌灵溶液，遮荫保湿，空气湿度保持在60%～70%，当植株萌发新根后让其逐渐见光，并降低湿度，直至暴露在外界条件下，移栽成活率可达75%～80%。
