2016年5月31日，《土壤污染防治行动计划》(简称“土十条”)正式由国务院印发实施。此次详查对检测项目、分析方法和参考标准做了明确的规定，其中关于土壤中硝基苯类化合物的测定，采用《土壤和沉积物 硝基苯类化合物的测定 气相色谱-质谱法》报批稿测试方法。
加压流体萃取技术是近年来发展起来的一种在高温、高压条件下快速处理固体或半固体样品的方法，与常用的索氏提取、超声提取、微波萃取技术等方法相比，具有节省溶剂、快速、回收率高、健康环保、自动化程度高等明显优势。
本实验介绍了使用莱伯泰科高效压力溶剂萃取系统（HPSE）提取土壤中的15种硝基苯类化合物，SePRO全自动固相萃取系统净化，MV5多通道平行浓缩系统浓缩后用气质联用仪进行检测的一整套方法。
01
实验部分
1.1仪器和设备
HPSE-E高效压力溶剂萃取系统（莱伯泰科公司）；
SePRO全自动固相萃取系统（莱伯泰科公司）；
MV5多通道平行浓缩系统（莱伯泰科公司）；
7890B气相色谱-5977B质谱联用仪（安捷伦公司）；
1.2 试剂和样品
正己烷（色谱纯）；丙酮（色谱纯）；二氯甲烷（色谱纯）；
快速溶剂萃取溶剂：正己烷-丙酮混合溶剂，1+1 （V/V）；
固相萃取洗脱溶剂：正己烷-二氯甲烷混合溶剂，1+9 （V/V）；
硝基苯类化合物标准使用液（200μg / mL，溶剂为正己烷）；
内标使用液（10 mg/L，溶剂为正己烷）；
替代物使用液（10 mg/L，溶剂为正己烷）；
弗罗里硅土固相萃取柱（1g/6mL，LabTech）；
硅藻土（置于马弗炉中450℃烘4h，冷却后贮于玻璃瓶中于干燥器内保存）。
1.3土壤样品处理
1.3.1 提取
取研细过筛后的环境土样5g，与3g硅藻土混合均匀，装填至11mL的萃取罐中。同样方法装填好两个萃取罐后，置于HPSE中（双通道运行，可同时萃取两个样品），萃取溶剂为丙酮－正己烷(1：1，体积比) 混合溶液，系统压力10.34Mpa，萃取温度100℃，加热平衡时间2min，静态萃取时间6min，冲洗体积60%，N2吹扫60s。循环运行两次。萃取液收集到60mL收集管中。
1.3.2 浓缩
将收集管置于MV5中，室温下，开启氮吹针定时跟随功能。浓缩过程中使用正己烷淋洗收集管，最后置换溶剂为正己烷，样品体积在1mL左右。
1.3.3 净化
净化过程采用弗罗里硅土柱净化方式。具体方法如下：
按照图1方法进行净化实验，其中正己烷二氯甲烷溶液配比为1：9，体积比。收集液用MV5浓缩，中间使用正己烷溶剂置换，最后用正己烷定容至1mL，待测。
图1 弗罗里硅土柱净化方法
1.4样品加标回收率实验
按1.3.1方法装填样品，进行加标实验，加标浓度为20μg/kg，然后按照1.3.1~1.3.3方法进行实验，共进行三组6个平行样品，最后用正己烷定容至1mL，用来测定加标回收率。
1.5 GC/MS检测条件
色谱柱：DB-5MS UI 毛细管柱30m*0.25mm*0.25μm；进样口温度：MMI进样口，采用程序升温进样模式，60℃保持0.05min，以750℃/min升至280℃，保持0min；不分流进样；载气流速：1.0mL/min；恒流模式；进样量：1.0μL；柱温：40℃保持4min，以10℃/min升至300℃，保持2min。
离子源：电子轰击源，70eV；四极杆温度：180℃；离子源温度：280℃；辅助加热温度：280℃；溶剂延迟时间：6.0min；扫描模式：SIM+Scan（化合物保留时间，定量和定性离子见下表）
表1 硝基苯类化合物定量和定性选择离子
02
实验结果
2.1 17种硝基苯类化合物色谱图分离情况（含内标和替代）
图2 硝基苯类化合物标准液总离子流谱图
2.2 加标样品的回收率
表2弗罗里硅土柱净化加标样品回收率
03
结 论
由表2可知，加压流体萃取-固相萃取-气质法测定土壤中的15种硝基苯类化合物，加标回收率在51%-119%之间，替代物标准品硝基苯-D5加标回收率平均值为50 %，2-氟联苯加标回收率平均值为67 %，完全符合标准中要求的加标样品回收率控制范围：40 % ~ 150 % 的质控要求。同时将六次分析的结果计算其RSD %，所有化合物的相对标准偏差均小于7.7 %，本方法测定的样品加标浓度为20μg/kg。
60mL收集管同时适用于这三种仪器，10mL收集管也可以用于SePRO和MV5之间，实验过程中不需要进行液体的转移，能够有效的减少转移过程中造成的损失。
综上所述，加压流体萃取-固相萃取-气质法测定土壤中的硝基苯类化合物这一实验中，莱伯泰科HPSE高效压力溶剂萃取系统、SePRO全自动固相萃取系统和MV5多通道平行浓缩系统能够高效、稳定地达到实验的要求，可以提供领域范围内的良好应用。
（来源：北京莱伯泰科仪器股份有限公司）
