【背景简介】

杆状病毒为环状双链DNA病毒，基因组大约80-180kb。

【主要结果】

（1）分析P33的结构和功能

在P33的三个螺旋中，螺旋e在目前可用的P33晶体结构中展现出差异变化。它在BmNPVP33结构（PDB：3UST）和之前报道的AcMNPVP33结构之一（PDB：3QZY）中是无序的，但是在另一个报道的AcMNPVP33结构（PDB：3P0K）和作者获得的结构确实恰恰相反。

（2）基于结构和保守区域的P33突变的设计

我们使用61种可用的杆状病毒P33氨基酸序列进行了基于序列的保守分析。然后根据保守水平将序列比对投影到我们的AcMNPVP33单体结构上。根据保守的结构区域设计了三组P33突变，以帮助确定P33功能。

（3）P33突变体的体外巯基氧化酶活性实验

实验数据表明活性位点和二聚体界面的突变对于P33的巯基氧化酶活性是关键的,而R127-E183盐桥的突变对活性也有影响，但是不显着。

（4）三个保守区的突变影响了病毒的形态

SEM结果表明，对照病毒AcBac-egfp-ph和P33回复的病毒具有光滑的表面和尖锐的边缘，而活性位点突变体H114A和盐桥突变体R127A-E183A的病毒具有不规则形状的表面粗糙。

【小结】

在这里，作者对P33的结构和功能关系进行了分析。首先基于晶体学表征和结构分析，构建了三个保守区域内的一系列P33突变体，即活性位点，二聚体界面和R127-E183盐桥。体外实验表明，活性位点和二聚体界面内的突变严重影响P33的巯基氧化酶活性，而盐桥的突变影响相对较小。通过电子显微镜和生物测定进一步分析。突变体H114A和R127A-E183A的闭合体（OB）具有粗糙的表面。所有三种突变体的OB含有较低数量的ODV，并且与对照病毒相比具有显着降低的口腔感染性。