• 材料

紫毛野牡丹种子。

• 培养条件

①MS。复壮培养基：②MS 6-BA1.0毫克/升 NAA0.5毫克/升。诱导培养基：③MS 6-BA1.0毫克/升 NAA0.1毫克/升。继代增殖培养基：④MS 6-BA2.0毫克/升 NAA0.1毫克/升；⑤MS 6-BA3.0毫克/升 NAA0.1毫克/升。生根培养基：⑥1/2MS IBA0.2毫克/升；⑦1/2MS NAA0.2毫克/升。以上培养基都附加30克/升蔗糖和6.5克/升琼脂粉，p小时为5.5-5.8。培养温度为（25±2）℃，光照强度为40-50微摩尔·平方米·秒，光照时间为14小时/天。

• 无菌材料的获得

用软刷蘸肥皂水轻刷紫毛野牡丹果实表面，用流水冲洗2小时，再用超纯水冲洗2-3遍后转到接种室。在超净工作台上，剖开果皮，收集种子，先以70%酒精浸泡30秒，无菌水冲洗3次；继以升汞消毒8分钟，无菌水冲洗5次。接种到种子萌发培养基①上。

• 种子萌发与壮苗培养

接种10天后，陆续有种子萌发，25天后大部分种子均萌发，将萌发植株的胚根切除，转接到壮苗培养基②上，30天后，植株高度达到4-6厘米。

• 不定芽诱导

在超净工作台上取出复壮的植株，将其切成1.0-1.5厘米的带芽茎段，接种到诱导培养基③上，20天后不定芽分化。试验发现带顶芽茎段诱导率较低，仅为2.5，不带顶芽茎段不定芽诱导率达到3.7。

• 继代增殖

将丛生芽分离，分别接种于增殖培养基④和⑤上，约25天后每个芽可分化出4-5个芽，35天后在培养基④和⑤上分别继代一次，均可生成大量丛生芽。2种培养基比较来看：培养基⑤增殖系数较高，达到5.3，但其基部出现大量愈伤组织，芽较弱，生长较慢；培养基④上的芽生长较快且粗壮，增殖系数达到4.5。

• 生根与移栽

将继代后的不定芽切成约3厘米的小段，分别转接到生根培养基⑥和⑦上进行生根培养。15天后基部分化出3-5条白色根，平均生根率分别达到94.0%和92.3%。当根长达到2.5厘米时，采取逐步开口炼苗法，炼苗8天后，出瓶洗去培养基，将试管苗移栽到灭过菌的基质中，保持适宜湿度，成活率达到80.2%。