大肠杆菌的Eco—gpt基因已经被克隆出来，并插入到各种不同的载体上，例如SV40晚期取代载体pSV2，构成新的重组质粒载体pSV2一gpt，使其置于SV40启动子的控制之下进行表达，因此有些作者也叫这种质粒载体为表达载体(图1)。猿猴细胞在感染上了这种质粒载体之后，便获得了表达Eco—gpt基因的能力，而且依据其对次黄嘌呤抑制作用的不敏感性和电泳迁移率的差别，就可以把这种外源的Eco—gpt表达产物，同内源的哺乳动物之HGPRT区别开来。

pSV2是在DNA肿瘤病毒SV40的基础上发展出来的一种新型的质粒载体家族。它是由从SV40早期转录单位派生出来的一种表达盒(expression cassette)，插入在pBR322质粒DNA上重组形成的。这个表达盒共有三个组件。第一个组件是Pvu Ⅱ—Hind Ⅲ区段，它含有SV40早期转录启动子及转录起始位点，但没有转译起始密码子ATG。这个组件的功能是启动插入在它的下游的外源基因进行转录；第二个组件是含有66bp长的小t蛋白质间隔子的DNA区段，其作用在于为异源的转录本提供一种剪辑给体及受体的位点；第三个组件是含有转录终止区及多聚腺苷酸化位点的DNA区段，起到终止转录反应和poly(A)加尾的功效。

pSV2质粒载体中另一种重要组成部分是pBR322质粒的DNA序列，包括一个原核的复制起点，和一个氨苄青霉素抗性(Amp^t)选择标记。

外源的选择标记基因Eco—gpt，以及neo和dhfr，以保持正确读码结构的Hind Ⅲ—Bgl Ⅱ片段形式，定向插入到pSV2质粒载体的Hind Ⅲ和MboI克隆位点上(Bgl Ⅱ和MboI为同尾酶)，由此便产生出pSV2一gpt、pSV2一neo和pSV2一dhfr三种不同的质粒载体，其中大T间隔子序列被破坏掉了(图1)。这些质粒载体在哺乳动物基因工程中有着十分广泛的用途，为克隆的异源基因提供了便利的检测、选择及表达的手段 。