常用的两种铁苏木素溶液有Weigert氏溶液(使用氯化铁铵作为媒染剂)和Heidenhain氏溶液(使用硫酸铁铵作为媒染剂)。它们都是活泼的氧化剂,不能长期保存。铁苏木精溶液能够用于几乎所有的固定剂,而且如果用于媒染的过量的铁离子都被冲洗净的话,能够永久着色。在酒精中浸泡多年的组织往往不易着色,这时就可以选择铁苏木素染色,效果很好。铁苏木素溶液会把细胞核染成灰黑色,常常用于显微照相。
Weigert
Weigert氏苏木素配方是实验室使用的标准铁苏木素溶液,特别是在染色显示肌纤维时。当使用的生物材料或已经用过的试剂中含有酸时,最适合使用的就是Weigert氏苏木素溶液,因为这时所有的铝苏木素溶液染细胞核时都会褪色。
A液
1g苏木素
100ml无水乙醇
B液
4ml 30%无水氯化铁溶液
1ml浓盐酸
100ml蒸馏水
在酒精中溶解苏木素,微热。在另一个容器中混合盐酸、氯化铁和蒸馏水。两种溶液都很稳定,可以放置6个星期不变质。染色前,把两溶液等量混合,得到深黑色混合液,即可染色。混合液可以保存1~2天。
Heidenhain
Heidenhain氏苏木素配方用于细胞学染色观察,特别是用于一些较薄的组织的回染。它可以用于细胞核的染色观察,能够清楚地显示染色体、染色质以及细胞质中线粒体的位置。此外,还可以使髓鞘染色。
染色剂:
0.5 g 苏木素
10 ml 95%乙醇
90 ml蒸馏水
媒染剂:
25 g 硫酸铁铵
100 ml蒸馏水
把染色剂和媒染剂分开配制,放置4~5星期成熟。染色时再混合。