用扦插繁殖。春至夏季为适期。剪取茎段2-4节为插穗,摘除茎下部的叶片,再斜埋于土中,保持湿度,适当遮荫,约以2-3周即可发根成长。也可采用水插法。选取茎叶较小的枝条为插穗,插入装有清水的玻璃杯或浅盘中,定期换水、添水,保持水质清洁,以防腐烂。
培养条件:①启动培养基:MS 6-BA2毫克/升 TDZ0.2毫克/升 NAA0.2毫克/升 IBA0.5毫克/升;②增殖培养基:MS 6-BA2毫克/升 TDZ0.4毫克/升 NAA0.05毫克/升 IBA0.2毫克/升;③壮苗培养基:MS 6-BA0.2毫克/升 NAA0.1毫克/升 IBA0.1毫克/升;④生根培养基:1/2MS 6-BA0.2毫克/升 40克/升蔗糖 IBA0.1毫克/升以上培养基(除生根培养基)中均添加3%蔗糖,各加8克/升琼脂粉,pH5.8-6。光照强度为40-50微摩尔/平方米/秒,培养温度为(25±2)℃,光照时间为12小时/天。
启动培养:实验材料采自宜宾职业技术学院生物工程实验苗圃三年生盆栽麒麟叶,以4月至5月采的外植体最容易启动。从母株上切取带顶芽和侧芽的茎段2-4厘米,在加有1%洗衣粉的洗涤液中漂洗3-5分钟,用毛笔蘸洗衣粉水刷洗,再用流水冲洗2小时。在无菌超净工作台上,将材料浸入70%酒精中浸泡消毒3秒,再转入0.1%升汞灭菌8分钟,无菌水冲洗5次。取出后用灭菌后的纱布吸干表面水,切去末端部分组织,放入无菌水中浸泡10分钟,以降低褐化,再用灭菌后的滤纸吸干,接种在培养基①中。接种24天后,基部开始膨大,顶芽最外层苞叶开始发褐干枯,56天后基部开始形成丛生芽,有些顶芽基部也会诱导产生少量愈伤组织。侧芽茎段培养46-60天后,腋芽开始萌动,60天以上才能形成丛生芽。
增殖培养:将诱导出的丛生芽分成小块,每块有3-4个小芽,同时将较大的芽切去部分叶片、转接入增殖培养基②中。30天左右芽块增殖产生大量的丛生芽,增殖系数达5.2倍。同时,芽块基部诱导产生的愈伤组织,在增殖继代过程中愈伤组织体积不断增大,并分化许多不定芽。增殖培养周期以40-60天为宜,增殖周期过长,往往导致芽生长势弱或愈伤组织褐化死亡。
壮苗和生根培养:将增殖的丛生芽分割,每块3-5个芽,接种到壮苗培养基③中,每50天转接1次,经过1-2代的培养,芽很快长高复壮,叶片很快展开,同时丛生芽还会继续增殖。将继代培养获得的健壮单苗接种到生根培养基④中进行生根培养,15天后开始生根,50天后根长可达2-20厘米不等,生根数为每个芽有2-4条带白毛棕色或绿色的根系,生根率达100%。
移栽:选取苗高3-5厘米、健壮单苗或生根丛芽植株在培养室内散射光条件下培养2-3天,将封口膜处于半打开状下培养2天,然后再将封口膜全部打开在温室大棚预培养2天,用清水洗净附着的培养基,在1000倍多菌灵溶液中浸泡30秒,然后移栽至珍珠岩:蛭石:河沙(1:1:1)的混合基质中,放于遮阴棚中,每3天淋1次水,相对湿度保持在80-90%,温度为20-25℃,成活率可达95%以上。随着丛芽不断长大,可分出单芽独立移植。