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小盐芥繁殖方法

2022/07/18330 作者:佚名
导读:材料类别 小盐芥的成熟种子。 培养条件 种子萌发培养基:MS。胚性愈伤组织诱导与胚状体生长发育培养基:①MS 6-BA1.0毫克/升 2,4-D0.5毫克/升;②MS 6-BA1.0毫克/升 IAA0.5毫克/升。丛芽诱导培养基:MS 6-BA(0.05-1.0)毫克/升。生根培养基:1/2MS。以上培养基均添加3%蔗糖和0.75%琼脂,pH5.8。培养温度26-28℃,光照时间12小时/天,光照

  • 材料类别

小盐芥的成熟种子。

  • 培养条件

种子萌发培养基:MS。胚性愈伤组织诱导与胚状体生长发育培养基:①MS 6-BA1.0毫克/升 2,4-D0.5毫克/升;②MS 6-BA1.0毫克/升 IAA0.5毫克/升。丛芽诱导培养基:MS 6-BA(0.05-1.0)毫克/升。生根培养基:1/2MS。以上培养基均添加3%蔗糖和0.75%琼脂,pH5.8。培养温度26-28℃,光照时间12小时/天,光照强度35微摩尔/平方米/秒。

  • 胚性愈伤组织的诱导与胚状体的生长发育

种子用70%的酒精消毒30秒,无菌水冲洗1次,0.1%氯化汞消毒15分钟,再用无菌水冲洗4-5次后,将种子接种到MS培养基上。黑暗下培养3天后,置光照下培养21天。随后取叶片和根为外植体进行实验。将叶片切成5毫米×5毫米大小,根切成5毫米长,分别接种于培养基①和②。一部分置于光下培养,另一部分置于暗下培养。14天后所有外植体的切口处均有愈伤组织产生。光照条件下培养基②上产生的愈伤组织为绿色,而其他培养基上的愈伤组织为黄白色。无论是光照条件下或是黑暗下,培养基②上产生的愈伤组织表面有很多突起,为胚性愈伤组织,而培养基①上产生的愈伤组织结构疏松。21天后,光下培养的胚性愈伤组织分化出芽。来源于叶片外植体的愈伤组织分化频率(90%±3.6%)高于根为外植体的(76%±4.5%)。在培养基②上于黑暗下诱导的愈伤组织,21天后转到光下培养,胚性愈伤组织进一步分化为芽。培养基①上产生的愈伤组织均未能产生胚状体或芽。

  • 芽的增殖

将再生芽接种到含有不同浓度6-BA的培养基中后,随着6-BA浓度的增加,芽出现玻璃化的现象加重,以培养基中添加0.2毫克/升6-BA的丛生芽生长最好,18天后芽的增殖系数达到6.8。

  • 根的诱导

将丛生芽切成单个芽,移入1/2MS培养基上,光下培养18天后,在不定芽基部长出白色的根,生根率为81%。

  • 试管苗的移栽

将生根的试管苗在培养室中敞瓶炼苗2-3天。取出幼苗并洗净基部培养基,移栽到装有经高温灭菌过基质(蛭石:河沙=1:1)的塑料盆中,在盆口盖上一张有小孔的塑料膜,以保持一定的湿度。等小苗长出新叶时,可揭开塑料膜。移栽成活率高达92%以上。

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