三叶草斑潜蝇特异引物的设计与筛选
斑潜蝇隶属双翅目(Diptera)潜蝇科(Agromyzidae)斑潜蝇属(Liriomyza),是一类重要的农业害虫。近年来,随着海峡两岸果蔬贸易的快速发展,斑潜蝇类害虫传入大陆地区的风险明显增加,植物检疫部门急需该类害虫的快速鉴定技术和方法。本研究针对我国进境检疫性害虫三叶草斑潜蝇(L.trifolii),在检测和检索其线粒体DNA细胞色素氧化酶I(mtDNA COI)基因序列并与其近缘种美洲斑潜蝇(L.sati-vae)和南美斑潜蝇(L.huidobrensis)相同基因序列比对的基础上,设计并筛选了其种类识别特异引物,初步实现了三叶草斑潜蝇的快速鉴定。
黄瓜棒孢叶斑病种子带菌PCR分子检测
利用真菌DNA-ITS区序列中的通用引物ITS1和ITS4,以黄瓜棒孢叶斑病菌的基因组DNA为模板,进行PCR,扩增出1条600 bp大小的条带。进行序列分析后发现其为黄瓜棒孢叶斑病菌的基因序列。根据黄瓜棒孢叶斑病菌(Corynespora cassiicola)与其他黄瓜病原真菌ITS序列间的差异,设计了1对特异性引物CCC1/CCC2,用于黄瓜棒孢叶斑病的种子带菌分子检测,从而对来自北京郊区黄瓜种子上的棒孢叶斑病的带菌情况进行了检测,发现来自房山和通州的黄瓜种子均在约600 bp出现特异性条带,说明黄瓜种子中携带棒孢叶斑病菌。
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