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同源重组(Homologous Recombination) 是指发生在非姐妹染色单体(sister chromatin) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。
同源重组需要一系列的蛋白质催化,如原核生物细胞内的RecA、RecBCD、RecF、RecO、RecR等;以及真核生物细胞内的Rad51、Mre11-Rad50等等。同源重组反应通常根据交叉分子或Holliday结构(Holliday Juncture Structure) 的形成和拆分分为三个阶段,即前联会体阶段、联会体形成和Holliday 结构的拆分。
同源重组(homologous recombination)是将外源基因定位导入受体细胞染色体上的方法,因为在该座位有与导入基因同源的序列,通过单一或双交换,新基因片段可替换有缺陷的基因片段,达到修正缺陷基因的目的。位点特异性重组是发生在两条DNA链特异位点上的重组,重组的发生需一段同源序列即特异性位点(又称附着点;attachmentsite,att)和位点特异性的蛋白因子即重组酶参与催化。重组酶仅能催化特异性位点间的重组,因而重组具有特异性和高度保守性。
根据氨基酸序列相似性和催化机制的差异,位点特异性重组酶主要分为两大家族,即整合酶系和解离酶/转化酶系,这两个家族相隔很远。整合酶家族催化重组的机制是进行酪氨酸介导的链交换,该家族包含有Cre/loxP、FLP/FRT等已经研究得比较清楚并广泛应用的重组酶系统。解离酶/转化酶家族催化机制是由丝氨酸介导的,当酶和DNA之间形成含磷的丝氨酸连接时,连接处DNA的4条链发生协调的交错断裂,然后重新结合,完成同源重组。该家族成员包括来自于链霉菌噬菌体的φC31整合酶、lactococcal噬菌体的TP901-1整合酶、放线菌噬菌体的R4整合酶等。中C31整合酶(φC31-int)能够有效介导噬菌体基因组中attP位点与细菌宿主染色体上attB位点间的重组反应,将外源基因整合到基因组中,使转基因的持续、高效表达,为非病毒载体转移系统在遗传病基因治疗的应用开辟了新的途径。
同源重组(Homologous Recombination) 是指发生在非姐妹染色单体(sister chromatin)之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组需要一系列的蛋白质催化,如原核生物细胞内的RecA、RecBCD、RecF、RecO、RecR等;以及真核生物细胞内的Rad51、Mre11-Rad50等等。 同源重组反应通常根据交叉分子或Holliday结构(Holliday Juncture Structure) 的形成和拆分分为三个阶段,即前联会体阶段、联会体形成和Holiday 结构的拆分。同源重组反应严格依赖DNA分子之间的同源性,100%重组的DNA分子之间的重组常见于姐妹染色体之间的同源重组,称为Homologous Recombination,而小于100%同源性的DNA分子之间或分子之内的重组,则被称为Hemologus Recombination。后者可被负责碱基错配对的蛋白如原核细胞内的MutS 或真核生物细胞内的MSH2-3等蛋白质"编辑"。同源重组可以双向交换DNA分子,也可以单向转移DNA分子,后者又被称为基因转换(Gene Conversion)。由于同源重组严格依赖分子之间的同源性,因此,原核生物的同源重组通常发生在DNA复制过程中,而真核生物的同源重组则常见于细胞周期的S期之后。
“周转材料”的理论缺陷及其重组
会计准则是企业反映经济活动、生成和提供会计信息的重要依据。我国自2006年2月以来,陆续制定了38项具体准则、32项准则应用指南及讲解、解释等,为企业执行会计准则提供了操作性规范。其中,在《企业会计准则第1号—存货》应用指南中提出了周转材料的概念,并在会计准则附录中设置了"周转材料"科目,规定了其核算内容和核算方法。本文从周转材料的概念入手,揭示了周转材料的理论缺陷,提出了重新整合的思路。
同源重组也称一般重组,多发生于两条DNA链的同源区,同源性愈大,重组愈频繁。
非同源重组又包括位点专一重组和非常规重组。
位点专一重组只需要很少的顺序同源性,它发生在两种DNA的专一位点上,如λ噬菌体整合到寄主大肠杆菌的染色体DNA上,就是发生在入- DNA及宿主DNA的特定位点上。
非常规重组不是发生在固定位点上,而是发生在任意位点上,两个DNA分子间可能只有几个碱基对的同源性,通常把由于转位因子引起的缺失、倒位等现象归于此类。
重组的种类繁多,分子机制和过程也很复杂,但DNA链的断裂和重接是最基本的重组机制。由于断裂后需要填平缺口和重新连接,这就牵涉到DNA的复制合成,所以一些参与DNA复制和修复的酶都可能与重组有关。基因作为遗传的物质基础应该是相对稳定的,以保持生物的遗传性,作为一种生物而繁衍下去,但生物的基因并不是一成不变的,基因重组为生物的变异和生物进化增添了新的内容。
生物进化树显示:在低等的大肠杆菌和啤酒酵母中基本上没有非同源重组;某些高等真菌和原虫中,同源重组和非同源重组大体各占一半;到了线虫和果蝇等无脊椎动物中,同源重组在所有重组事件中比例已经很小,而在哺乳动物中这一比例是最小的。
“回归机制” (fallbackmechanism ) 的理论具有一定权威性。这种机制假定,当染色体DNA发生双链断裂时,距离中心粒较远的DNA将在下一个细胞分裂周期中丢失。因此,通过非同源重组将脱落的DNA片断随机地连在染色体的任何一个地方,都比让它们完全丢失更有利。这是一种保持染色体完整性的方法,对动物个体的存在是有利的。2100433B