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一般大多微电泳仪均能进行自动电流平衡,一般不会产生伪迹,但手工操作时应注意。
如果所要电泳的药物的溶解度和离子化程度低,则其传导性也低,而传导性越低,就越易产生较高的电噪声。
在较高电噪声下,即使维持稳定的注射电流,但其对离子的泳出率也往往大大偏离理论值,可采用下列方法克服:尽可能选用尖端大的电极,可达10μm左右;将该物质充灌于周边多个周边管中,实施电泳时分别是以较小的注射电流同时从几个管内将药物排 出,这样可减少噪声,如果所要电泳的药物的溶解度和离子化程度较高,则噪声一般不成问题。
许多情况下,电泳某药物观察其生物学效应时需要重复几次并且给一个固定剂量。
由于迟滞电流的存在,使得电极尖端的药物浓度降低,所以一开始后的即早期,所排出的药物较少,随后逐渐上升至一个平台。这取决于注射电流的大小和开始电泳时电极尖端离子浓度的高低。
因此重复给药时,应该以固定程序进行:固定大小的注射电流、固定的注射时间(应足以使药物释出和反应达到平台值)、固定间隔时间等,达到相对定量的目的。
五、或七管微电极,一般每管尖端直径约1μm,七管总直径5-8μm.。若充灌的 是小分子物质,如NMDA、Glu等,则每管尖端直径可以是0.5μm, 七管总和为3-4μm,这样可使记录管电阻高达5MΩ-10MΩ,周边管达40MΩ-100MΩ,不仅能满足电泳要求,还能记录到较大的电位。若充灌的是大分子肽类,则直径要大一些,一般不能超过10μm,否则易致泄漏,且电痊记录过小。但本法虽然解离量与电流成正比,但不同的微电极或不同的物质的实际释出量有很大差异,且无规律可循。应将微电泳与整体功能结合起来,才能得出正确的结论。
微电极充灌一般多为较高浓度的NaCl (4mol)或KCl (3mol)以使电极尖端获得高离子浓度,从而得到低阻抗微电极。其中一个周边管充以150mmol/L NaCl作平衡电流用,其余根据需要充不同灌注液。充灌方法有许多种,压力法,充灌注,真空法,酒精法等,最常用的是玻璃纤维法。
(1)浓度:增加传导性并减少噪声,可用较高浓度的溶液,以使所要电泳的离子具有较高的浓度和稳定形式一般微电泳溶液浓度为5-500mmol/L不必过大。对于效能很强的化学物质,可用150mmol/L的NaCl作为溶剂,溶液浓度尽量低,以防止因药物扩散引起的生物学效应。
(2)pH值:常用低浓度(0.1N)盐酸或NaOH将溶剂调整到适当的pH值,以增加溶质的溶解度和稳定度。但有些物质,如中性氨基酸难以离子化。此时可参考其pKa值调整,使pH=pKa-1,这可使90%氨基酸离子化。根据经验,一般pH为3.5-4.0。完全不能离了化物质可用微压力法注射。另外,充灌注一定要干净,避免污染。
(3)防止药物漏出,可通过持续施加一个带极性的"迟滞电流"来防止。迟滞电流的极性方向与所要电泳的离子所带电荷相反,这样使得所要电泳的离子向回移动(对抗漏出),从而使尖端离子浓度降低,一般电流大小应根据实际情况具体调整,一般为10-30nA。有些效能很强的物质则需施加较大的迟滞电流。
(4)注射电流。其大小和持续时间以能产生预期的生物学效应为标准。注射电流的极性方向与迟滞电流方向相反,即和甩要电泳的离子所带电荷相同。
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勘察注意事项
第一条现场勘察人员数量要求:为确保通信工程勘察中的人员及财产安全,勘 察中要确保二人(不少于二人)以上为一勘察小组进行现场勘察。 第二条工程设计人员在电力线附近勘察时应注意:如在通信线路附近有其他线 条,在没有辩清其性质时, 勘察中一律按电力线处理。 电力线与电信线碰触或电 力线落在地上时,应立即停止勘察,通知维护人员到现场排除事故。 第三条工程设计人员在室外勘察时应注意个人防雷、防电: (一)遇雷雨、大雾天气,不应对室外高压设备进行查勘,如果必须进行查勘, 应穿好绝缘靴。 (二)室外勘察遇到雷雨天气时,应停止勘察,等雷雨过后再继续勘察;若无法 避免时,要注意个人防雷。查勘时遇潮湿的地面、墙面、电气设备等处,应有防 止触电的措施,如穿绝缘靴、避免人体触及墙面、设备等。 (三)遇雷雨天气,不得靠近避雷器装置;切勿接触天线、水管、铁丝网、金属 门窗、建筑物外墙,远离电线等带电设备或其他类似金属
出国注意事项
如果你要出国合法的工作,无论要去哪个国家,那么既然要去工作,就一定要申请这个国家的工作签证。只有工作签证可以让你在这个国家合法工作。 国内有许多“出国劳务中介公司”声称可以办理美国、加拿大、澳大利亚、新西兰、英国、瑞典、希腊以及其它发达国家的工作签证合法去打工。 再看这些中介发布的工作内容大部分是一些普通而简单的工作,如:司机、包装工、农场工,装修工,服务员,超市理货员,收银员以及各类工人等等。这些中介承诺出国之后工资待遇很高。而中介收费往往是在前期就要收几万元,出国工作以后再从工资中扣除剩余的费用几万至十几万不等。甚至还承诺你工作几年之后可以移民。这样的事情大家听起来好像还不错,但事实是上述国家的工作签证基本上是办不下来的。因为发达国家原则上不需要外来的普通劳工,这样会影响本国就业的。所以发达国家的工作签证是有很严格的申请条件的,原则上是签发给高学历高技术的专业人士。