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污染一般分为真菌性污染和细菌性污染,其来源可分成3大类:材料带菌,接种污染,培养过程
感染。污染是桉树组织培养过程中的难题,特别在春夏季高温高湿季节组培苗的污染率相当高,对组
培苗的工厂化生产造成很大的损失,如何控制桉树组培的污染问题已成了桉树组培工厂化育苗的关键
,外植体消毒与接种 诱导培养的关键在于外植体是否消毒彻底以及被损伤,这取决于以下几个方
面"外植体的自身生理情况"桉树的初代培养一般以带芽茎段作为外植体来诱导腋芽萌发,选取木质
化程度适中!生命力旺盛的枝条,桉树无性系采穗圃里当年生的健壮枝条,或成年植株的基部萌条作为外
植体,诱导容易,成活率可达到70%~80%以上;消毒剂的选择及消毒时间的长短"桉树带芽茎段的消
毒大多选用11%升汞和75%酒精相结合的消毒方式,茎段的木质化程度不同,酒精和升汞消毒的时间
不一样,一般酒精消毒的时间为10~60s,升汞消毒的时间为1~10min"对于很嫩的带芽茎段酒精消毒
的时间低于10s,即茎段在75%酒精里浸泡5s左右时马上倒入无菌水进行清洗,然后用011%升汞消毒
40s左右;对于很老的茎段酒精消毒达1~2min,升汞消毒达10~15min"外植体的采集时间"枝条的。
[1].真菌的污染
真菌(fungi)一类没有叶绿素,异养的真核微生物,除极少数种类是单细胞外,绝大多数是由多细胞组成的
菌丝,结成一团的菌丝称菌丝体,菌丝分有隔菌丝和无隔菌丝两种.在地球上泛存於空气、水、土壤以及
各类生物的体表或体内。皆可有真菌生长。大气中已知的真菌有11255属10万种,在室内常附着在物体表
面,能自动或随人的活动而扩散。种类丰富,分布广泛,繁殖快速,无处没有,无处不在。一个季节繁殖
4-5代,孢子可达1万亿个。
室内真菌种类:主要有芽枝孢霉属、曲霉属、铰链孢霉属、镰刀霉属、青霉属等,真菌数量的多少,与温
度、湿度有很大关系。真菌以腐生、寄生或共生的型式进行异营性生活。释放消化酵素於邻近的环境,以
分解食物成较小的水溶性分子进入细胞内消化。并可於菌丝产生孢子以完成有性或无性繁殖。
真菌季节变化:春、夏季.尤其是南方的梅雨时节.温暖潮湿,非常适合真菌生长。冬季室内真菌浓度较
高。
空调加重污染:如果长期使用空调而不注意通风,可引起室内真菌污染。室内有空调比没有空调情况下曲
雾菌落数多4倍。
吸器
[2] 细菌的污染
细菌(bacteria)是一类微小的单细胞生物,约有2000多种。从形态上看,细菌可以分成球菌、杆菌
和螺旋菌3类。细菌是无孔不入的微生物,儿童玩具、手机、计算机键盘和衣服上,甚至植入人体的医用
植入物等(如心脏起搏器),都随时有可能沾染细菌,对人体造成危害。为避免细菌的侵袭,科学家曾尝
试用抗微生物材料生产各种用品,但效果不十分理想,因为这些材料虽然能杀死细菌,却充满化学物质。
细菌是处于生物和无生物之间的东西。
泥土里、水里、都市的空气里都有细菌散布着;多到50种以上,三类细菌的形状:就是球形的,杆形的,
及螺旋形的。球形的有的正圆,有的卵圆,杆形的有长有短,有的微弯,螺旋形的也有长短和弯曲的转数
多少的不同,有的生着细毛,毛长与短多少不定。生毛的细菌会游泳。虽然概括地说,形状只有球形、杆
形、螺旋形这几种,但细分起来,形状还是很不少。论大小,它长约1~2微米,阔0.5微米余。病菌,能
分泌出毒质,如果寄生在体里,因病菌种类的不同,人就会发生不同的疾病。
[3]污染防治
污染源[1]户外风大菌类进屋机会多[2]屋内太潮菌类繁衍多[3]物品带菌多[4]屋内不干净
[5]屋内清理带菌组培苗[6]接种不正确
措施
通风:经常开窗,保持室内空气流通.可以使室内真菌数量减少。通风方法简便易行.应多使用。
去湿:保持室内空气干燥,如使用空调“除湿”功能,也可减少真菌生长繁殖。
光照:紫外线能杀灭或抑制真菌生长,有调查发现下午一时是大气细菌粒子沉降的一个低谷,说明太阳辐射对空气微生物有明显的杀灭作用。因此.保持室内较好采光.在梅雨季节后将衣物等晾晒.对减少室内真菌污染大有好处。
防霉:污染物品和污染培养基不要在培养室近距离开瓶洗刷。
1、A与B药剂不可分开使用,否则抗污染效果会降低。
2、未使用完毕的混合母液可用冰箱冷藏1个月,并在上述期限内使用完,否则抗污染效果会降低。
3、高浓缩植物组织培养高效抗污杀菌剂(生根型)S106在未稀释情况下,避光、常温25℃下保质期一年,冰箱冷藏二年。
4、本品为植物组织培养专用药剂,不能用作人和动物的疾病消毒。
植物组织培养高效抗污杀菌剂S106是一种长效、广谱、高活性、植物组织培专用防污染杀菌剂,本品具有用量少,使用方便,操作安全、配伍性好,其活性成分对环境无残留,不破坏培养基活性成分、耐高压灭菌、稳定性高、使用成本低等优点,可有效降低瓶苗废弃率,降低组培成本,提高组培效益。
一、 使用方法
1、 S106母液的配制
先把S106A(白色粉末)用350毫升左右无菌水充分溶解,再把S106B(液体有结晶)开瓶前摇匀,再打开瓶盖倒入其中,(用无菌水洗瓶二次倒入)。充分溶解后用无菌水定容至500毫升,瓶装低温贮藏。
2、 使用方法
按增殖、生根堷养基配方加入各种母液、琼脂、蔗糖、激素,每升培养基加入S106母液0.2至0.3毫升,充分搅拌均匀煮开后再进行分装。
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污染一般分为真菌性污染和细菌性污染,其来源可分成3大类:材料带菌,接种污染,培养过程
感染。污染是桉树组织培养过程中的难题,特别在春夏季高温高湿季节组培苗的污染率相当高,对组
培苗的工厂化生产造成很大的损失,如何控制桉树组培的污染问题已成了桉树组培工厂化育苗的关键
,外植体消毒与接种 诱导培养的关键在于外植体是否消毒彻底以及被损伤,这取决于以下几个方
面"外植体的自身生理情况"桉树的初代培养一般以带芽茎段作为外植体来诱导腋芽萌发,选取木质
化程度适中!生命力旺盛的枝条,桉树无性系采穗圃里当年生的健壮枝条,或成年植株的基部萌条作为外
植体,诱导容易,成活率可达到70%~80%以上;消毒剂的选择及消毒时间的长短"桉树带芽茎段的消
毒大多选用11%升汞和75%酒精相结合的消毒方式,茎段的木质化程度不同,酒精和升汞消毒的时间
不一样,一般酒精消毒的时间为10~60s,升汞消毒的时间为1~10min"对于很嫩的带芽茎段酒精消毒
的时间低于10s,即茎段在75%酒精里浸泡5s左右时马上倒入无菌水进行清洗,然后用011%升汞消毒
40s左右;对于很老的茎段酒精消毒达1~2min,升汞消毒达10~15min"外植体的采集时间"枝条的。
[1].真菌的污染
真菌(fungi)一类没有叶绿素,异养的真核微生物,除极少数种类是单细胞外,绝大多数是由多细胞组成的
菌丝,结成一团的菌丝称菌丝体,菌丝分有隔菌丝和无隔菌丝两种.在地球上泛存於空气、水、土壤以及
各类生物的体表或体内。皆可有真菌生长。大气中已知的真菌有11255属10万种,在室内常附着在物体表
面,能自动或随人的活动而扩散。种类丰富,分布广泛,繁殖快速,无处没有,无处不在。一个季节繁殖
4-5代,孢子可达1万亿个。
室内真菌种类:主要有芽枝孢霉属、曲霉属、铰链孢霉属、镰刀霉属、青霉属等,真菌数量的多少,与温
度、湿度有很大关系。真菌以腐生、寄生或共生的型式进行异营性生活。释放消化酵素於邻近的环境,以
分解食物成较小的水溶性分子进入细胞内消化。并可於菌丝产生孢子以完成有性或无性繁殖。
真菌季节变化:春、夏季.尤其是南方的梅雨时节.温暖潮湿,非常适合真菌生长。冬季室内真菌浓度较
高。
空调加重污染:如果长期使用空调而不注意通风,可引起室内真菌污染。室内有空调比没有空调情况下曲
雾菌落数多4倍。
吸器
[2] 细菌的污染
细菌(bacteria)是一类微小的单细胞生物,约有2000多种。从形态上看,细菌可以分成球菌、杆菌
和螺旋菌3类。细菌是无孔不入的微生物,儿童玩具、手机、计算机键盘和衣服上,甚至植入人体的医用
植入物等(如心脏起搏器),都随时有可能沾染细菌,对人体造成危害。为避免细菌的侵袭,科学家曾尝
试用抗微生物材料生产各种用品,但效果不十分理想,因为这些材料虽然能杀死细菌,却充满化学物质。
细菌是处于生物和无生物之间的东西。
泥土里、水里、都市的空气里都有细菌散布着;多到50种以上,三类细菌的形状:就是球形的,杆形的,
及螺旋形的。球形的有的正圆,有的卵圆,杆形的有长有短,有的微弯,螺旋形的也有长短和弯曲的转数
多少的不同,有的生着细毛,毛长与短多少不定。生毛的细菌会游泳。虽然概括地说,形状只有球形、杆
形、螺旋形这几种,但细分起来,形状还是很不少。论大小,它长约1~2微米,阔0.5微米余。病菌,能
分泌出毒质,如果寄生在体里,因病菌种类的不同,人就会发生不同的疾病。
[3]污染防治
污染源[1]户外风大菌类进屋机会多[2]屋内太潮菌类繁衍多[3]物品带菌多[4]屋内不干净
[5]屋内清理带菌组培苗[6]接种不正确
措施
通风:经常开窗,保持室内空气流通.可以使室内真菌数量减少。通风方法简便易行.应多使用。
去湿:保持室内空气干燥,如使用空调"除湿"功能,也可减少真菌生长繁殖。
光照:紫外线能杀灭或抑制真菌生长,有调查发现下午一时是大气细菌粒子沉降的一个低谷,说明太阳辐射对空气微生物有明显的杀灭作用。因此.保持室内较好采光.在梅雨季节后将衣物等晾晒.对减少室内真菌污染大有好处。
防霉:污染物品和污染培养基不要在培养室近距离开瓶洗刷。
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