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非渗透性冷冻保护剂一般是些大分子物质，不能渗透到细胞内。
非渗透性冷保护剂主要包括聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖、白蛋白及羟乙基淀粉等。
保护机制的假设很多，其中一种可能是聚乙烯吡咯烷酮等大分子物质可以优先同溶液中的水分子相结合，降低溶液中自由水的含量，使冰点降低，减少冰晶的形成;同时，由于其分子量大，使溶液中电解质浓度降低，从而减轻溶质损伤。
