-抗碱性磷酸酶复合物制备技术

Mason等(1978)，用碱性磷酸酶代替过氧化物酶，建立了碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶复合物(APAAP)桥联酶标技术。但以AP作为抗原用常规免疫方法制备的抗血清，很难达到APAPP桥联酶标技术的质量要求，在一定程度上限制了此项技术的推广使用。杨志刚等(1989)利用抗AP的McAb建立了一种制备APAAP复合物的简便方法。只需将AP和抗AP的McAb以适当比例混合，4℃结合过夜即可使用。采用改良的ELISA方法检测APAAP复合中AP的最适含量。具体方法是:用羊抗鼠Ig包被微量滴定板;加入一定量的抗APMcAb;分别加入不同量的AP作用后经过洗涤;加底物显色，测定光密度值(OD)。在一定范围内，APAAP复合物溶液中AP含量增加的同时，相应的OD值也随之增大;当AP增加到一定量时(约6~8mg/mL)、OD值保持稳定。