多抗的纯化是一件比较简单的事情,因为人工干预比较大,所以对实验者的操作依赖性较强。很多新手觉得这是一件比较复杂困难的工作,但是如果理解了原理,就可以自行改进实验了。多抗纯化方法比较多,过去有用盐析法纯化的,有用辛酸-硫酸铵沉淀的方式纯化的,也有用冷酒精沉淀的方式纯化的,也有后来的离子交换层析和Protein A,G,A/G纯化的,但是在今天,市场上几乎所有的抗体都是通过抗原亲和纯化得到的,与其它方法相比,抗原亲和层析得到的抗体效率高、产量高、产品纯、操作简单。
步骤如下:
1、介质的制备
2、抗原与填料的连接
3、连接效果的评估
4、多余位点的封闭
5、抗血清与beads的结合
6、非特异性结合的抗体的洗涤
7、洗脱
具体 操作与原理可以看看中国免疫学实验网上的详细讲解。