​为避免电流衰减(rundown)现象的影响，电极内液中加入ATP，并控制实验在细胞破膜后25分钟内完成。根据实验设计，将配制好的药物溶液，用恒流蠕动泵以2ml/分钟速度向细胞灌流槽分别灌流，同时使用整负压吸引装置将废液从灌流槽中吸除。记录方法为破膜后稳定5分钟记录给药前的电流值，给药5分钟后记录药物作用下的电流值。采样后数据存贮在电脑硬盘内，供测量及分析用。为消除细胞间误差，电流值以电流密度(pA/pF)表示。

用急性酶解法制备心室肌单个细胞。取大鼠用50mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，开胸取出心脏，在4℃无钙Tyrode液中去除脂肪和心包膜，分离主动脉并插管，行Langendorff心脏灌流(图1)，速度为6~8ml/min。先以无钙台氏液灌流3分钟(灌注压为20cm水柱)，洗净冠脉内血液，再用低钙酶解液(CaCl2为0.05mmol/L低钙台氏液,含Ⅱ型胶原酶0.4mg/ml，链蛋白酶E0.04mg/ml)循环灌流，大约20分钟后，将心脏从Langendorff装置上取下，置入室温KB液中，剪去心房和基底部的组织，持眼科镊将心室组织轻轻撕拉，用粗开口的吸管缓慢吹打，使心肌细胞从心肌组织上脱离，获得单个心室肌细胞,上清液用120目的尼龙过滤网过滤，心肌细胞收藏在含KB液的试管中。整个灌流系统温度保持在37℃，所有的灌流液和KB液均通以100\%的O2饱和30分钟以上。将细胞在室温下静置半小时左右复钙至0.25mmol/L，室温保存备用。

吸取少许富含细胞的KB悬液于0.5ml的灌流槽中，静置5~10分钟，待细胞沉底附壁后，用100\%O2饱和的细胞外液实验前吸取少许富含细胞的KB悬液于0.5ml的灌流槽中，静置5~10分钟，待细胞沉底附壁后，用100\%O2饱和的细胞外液进行表面灌流5~10分钟，流速约2ml/分钟。在倒置显微镜(OLYMPUS1×70)下选择边缘清楚、表面光滑、横纹清晰、无收缩的细胞。实验在22~24℃室温下进行。采用Hamill等人的标准全细胞膜片钳记录方法，在电压钳制模式下记录通道电流。膜片钳放大器(Axopatch700B，美国Axon公司)，通过A/D和D/A数据转换器(Digidata1322，美国Axon公司)同计算机相连接。刺激信号及电压、电流输入信号的采集均由软件(pClampex10.0，美国Axon公司)控制。玻璃毛胚管(中国科学院物理所提供)经微电极拉制仪(p-97，美国Sutter公司)进行4步拉制而成，经抛光仪(MF-830，日本Narishige公司)抛光后尖端直径2~3μm。充灌电极内液后入水电阻为1.5~3MΩ，补偿液接电位后，调节三维操纵器(mhw-3，日本NARISHIGE公司)使电极尖端移向细胞表面，形成高阻封接(gigaseal)，封接电阻为1GΩ以上。补偿快电容并吸破细胞膜形成全细胞记录模式。电容测定时给予-10mV跃阶的刺激，采用Cm=τ·Iss/△V求膜电容。调节慢电容补偿和串联电阻补偿80\%~90\%以减少瞬时充放电电流和钳位误差。信号经截止频率为1kHz的4阶贝塞尔低通滤波器，采样率为10kHz。