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物质的荧光强度F与激发光的波长和所测量发射光的波长有关,将F的数据用矩阵形式表示,行和列对应不同的激发光波长和发射光波长,每个矩阵元分别为该激发光、发射光波长的荧光强度F,称之为激发-发射矩阵,简称EEM。描述荧光强度及同时随激发波长和发射波长变化的关系图谱即为三维荧光光谱。三维荧光光谱有两种表示形式。