可扦插繁殖，5-8月进行。茎尖长5-7厘米作插穗，这样所获的新株生长迅速，很快就能成形。亦可全年育苗，发苗迅速，成形快。幼苗长出较多新根时即可栽种。若不更新植株可连续栽培不宜超过8个月。
所用培养基：在实际操作中，可以根据不同的阶段选择以下培养基：①芽诱导可采用添加BA0.5毫克/升 NAA0.1毫克/升的MS培养基；②根诱导可采用添加IBA0.1毫克/升的1/2MS培养基；③继代培养可采用添加BA0.5毫克/升 NAA0.01毫克/升的MS培养基。所有培养基均要添加蔗糖30克/升；琼脂6克/升；并将pH调整为5.6-6。
外植体处理：圆叶假马齿苋的组织培养以茎尖作为外植体效果较好。可从用扦插、分株法所繁殖的植株上取材。在此之前2-3周，最好把母株置于温室内培养，不要给它唢水。在接种前选择健壮无病的茎尖剪下，将其进行常规消毒后备用。
培养条件：切割已经灭菌的茎尖，使之长5-6毫米，然后保持极性接种到芽诱导培养基上。经过2-3周的培养后，外植体上开始形成愈伤组织， 并长出不定芽。这时可以将其切割成数丛进行继代培养。再经过4-6周的培养后，便会有大量的嫩茎形成。选择2-3厘米长者剪下，转接到生根培养基上。经过2-3周后，即可将生了根的试管苗出瓶。培养温度为23-25℃；每天光照10-12小时；光照度为1500-2000勒克斯。
