从AS1.1084分离带有色氨酸操纵子的F质粒,Smal酶切与Smal酶切的pBR322 DNA相连,构成带有色氨酸操纵子重组质粒pMDC21.BglⅡ酶切pDMC21,大片段自环化后,得到了带有L-色氨酸合成酶基因(TrpAB)的衍生质粒pYNC51.这种构建方式尚未见报道.在基础培养基培养时,以AS1.1044和AS1.1042作宿主菌株为好,培养100代质粒稳定程度分别为100%和98%.摇瓶培养工程菌M151(pYNC51),以基础培养基1号为好,菌体浓度为4.5,比酶活为9.9.培养基的起始pH6.5-8.5均可,随着起始葡萄糖浓度增加,菌体浓度逐渐下降,而酶活力却逐渐上升.种子接种量以10%效果为好.细胞转化5%的吲哚和L-丝氨酸,产L-色氨酸相当于88.3克/升.
