当以色列人在旷野里流浪时，约柜一直都放在流动圣幕的至圣所内，直到所罗门王於耶路撒冷兴建圣殿为止。

约柜是以色列人的圣物，象徵着耶和华的临在，根据摩西律法规定，只有作为祭司的利未人才可以抬扛约柜，但是任何人都不得触碰约柜。根据《圣经》记载，乌撒在运送约柜其间违反上帝的律法，擅自触碰约柜被处死。

约柜离开圣幕

在撒母耳先知的日子，示罗的遭遇使以色列人的宗教感情大受打击。他们以为神圣的约柜可以拯救他们，使他们不致被非利士人所击败。因此他们将约柜从设於示罗的帐幕的至圣所中取出，目无法纪的祭司，大祭司以利的两个儿子，将约柜带到战场上。但是约柜并没有保护他们，使他们不致遭受他们肆意违反耶和华的律法所招致的恶果。很不幸地，约柜落入信奉异教的非利士人手中，以利两个作祭司的儿子，何弗尼和非尼哈，均在战场上被杀。当肥胖的大祭司以利获悉这个不幸的消息时，他晕倒在地，结果折断颈骨而死。以色列人继续受非利士人所压迫。虽然崇拜偶像的非利士人後来因为饱受灾祸打击而将约柜遣回，象徵耶和华临在的神圣约柜却永没有返回示罗的神圣帐幕中。

约柜返回耶路撒冷

大约70年以后，大卫尝试运送约柜去耶路撒冷。当时约柜放在牛车上，乌撒和他兄弟领着前行。圣经说：“他们到了拿康的脱谷场，当时牛险些弄翻车子，乌撒就伸手抓住上帝的约柜。耶和华向乌撒发怒。上帝因乌撒行为不敬而击杀他，他就当场死在上帝的约柜旁。”几个月後，大卫按照上帝指定的方式运送约柜，由利未族哥辖人扛抬着送到耶路撒冷去，这次一路顺顺利利。