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纸电泳(Paper Electrophoresis,PE)指用滤纸作为支持介质的电泳方法,是最早使用的区带电泳。在对某些蛋白质(如糖蛋白、脂蛋白等)的分离尤其对氨基酸混合物的分离非常有效。
将滤纸条水平架设在两个装有缓冲溶液的容器之间,样品点于滤纸中央。当滤纸条被缓冲液润湿后,再盖上绝缘密封罩,即可由电泳电源输入直流电压(100V~1000V)进行电泳。
醋酸纤维素薄膜电泳的特点是分离速度快、电泳时间短、样本用量少,特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测,广泛用于分离和测定血清蛋白、血红蛋白、糖蛋白、结合球蛋白、脂蛋白、同工酶等的临床医学检验。电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、染色、脱色与透明即可得到满意的分离效果。
凝胶电泳(Gel Electrophoresis)是由区带电泳派生出的一种用凝胶物质作为支持物的电泳方式。常用的凝胶为葡萄糖、交联聚丙烯酰胺和琼脂糖。这种介质具有多孔性,有类似于分子筛的作用,流经凝胶的物质可按分子的大小逐一分离,因此广泛用于测定蛋白质的分子量。
等电聚焦电泳(Isoelectric Focusing Electrophoresis,IFE)是一种利用有pH梯度的介质,分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。将等电点不同的蛋白质混合物加入有pH梯度的凝胶介质中,在电场内经过一段时间后,各组分将分别聚焦在各自等电点相应的pH值位置上,最后,样品的各组分在各自的等电点聚焦成一条清晰而稳定的窄带。
等速电泳(Isotachophoresis,ITP)采用两种不同浓度的电解质组成,一种为前导电解质,充满整个毛细管柱;另一种为尾随电解质,置于一端的电泳槽中。前导电解质的迁移率高于任何样品组分,后者则低于任何样品组分,被分离的组分按其不同的迁移率夹在中间,在强电场的作用下,各被分离组分在前导电解质与尾随电解质之间的空隙中移动,实现分离。
双向凝胶电泳又称二维凝胶电泳,主要用于分离和分析混合的蛋白质组分,是优于其它方法能够连续地在一块胶上分离数千种蛋白质的方法。
该方法第一向采用等电聚焦,根据复杂的蛋白质成分中各个蛋白质等电点不同,将蛋白质进行分离。第二向采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,按蛋白质分子量的大小使其在垂直方向进行分离。其结果呈现为斑点状。
免疫电泳(Immunoelectrophoresis)是琼脂平板电泳和双向免疫扩散两种方法的结合。将抗原样本在琼脂平板上先进行电泳,使其中的各种成份彼此分开,然后加入抗体做双向免疫扩散,已分离的各抗原成分与抗体在琼脂中扩散而相遇,在两者比例适当的地方形成复合物,呈现出可见的沉淀弧。
根据自动化程度不同分为:半自动电泳和全自动电泳。
根据用途不同分为:蛋白电泳、核酸电泳等。
根据原理不同分为:等速电泳、等电聚焦电泳、免疫电泳等。
根据电泳中是否使用支持介质分为:自由电泳和区带电泳。
物质分子在正常情况下一般不带电,即所带正、负电荷量相等,不显示带电性。但是在一定的物理作用或化学反应条件下,某些物质分子会成为带电的粒子。利用带电粒子因带电性质、颗粒形状、大小及所带电量不同会导致移动速度及方向也不同的性质,实现对样本中不同成分的分离和分析。
不同公司生产的,不同型号的操作都不一样的吧。便携的很好用的,基本上照一下就出来了。科研用的大型光谱仪有专门的售后指导的,使用起来也很复杂。基本上就是光源出光,照到样品上,或反射或透射接收后同过软件分析...
测定原理总有机碳(TOC),由专门的仪器——总有机碳分析仪(以下简称TOC分析仪)来测定。TOC分析仪,是将水溶液中的总有机碳氧化为二氧化碳,并且测定其含量。利用二氧化碳与总有机碳之间碳含量的对应关系...
一般说来,一台功能较为齐全的音频分析仪器应能测量信号交直流电压、信号频率、谐波失真、信噪比等参数。功能强大的音频分析仪器提供频谱分析、1/3倍频程分析、倍频程分析、声压级测量等功能。如果要组建...
电场强度越大,电泳速度越快。但增大电场强度会引起通过介质的电流强度增大,从而造成电泳过程中产热过多,引起介质温度升高,影响电泳效果。降低电流可以减少产生热量,但会延长电泳时间,减慢待分离生物大分子的扩散而影响分离效果。
主要体现为样本溶液的pH、离子强度和黏度等。pH影响带电粒子的解离程度,决定物质所带净电荷的多少。当pH为蛋白质的等电点时,蛋白质所带净电荷为零,此时蛋白质在电场中不会发生移动。
适合电泳的离子强度为0.02-0.2。离子强度过高,带电颗粒会将溶液中与其电荷性相反的离子吸引在自己周围形成离子扩散层,从而降低粒子的电泳迁移速度。离子强度过低,电泳迁移速度会因为溶液pH变化而受到影响。
温度过高引起样本分离带加宽;温度过高产生对流,易引起待分离物的混合;对热敏感样本易引起蛋白质变性;导致介质黏度降低、电阻下降,影响电泳效果。
电渗是指电泳过程中液体对固体的相对移动。如果电渗方向与待分离分子电泳方向相同,则电泳速度加快,反之则减慢。
支持介质的筛孔具有分子筛的作用,能够分离分子。其大小对待分离生物大分子的电泳速度有明显影响。筛孔大的介质中,电泳速度快,反之则慢。此外,只是介质的黏性可阻碍泳动,起到吸附作用。
电泳加工设备使用方法及技巧
电泳设备使用注意事项 ( 1)一般金属表面的电泳涂装,其工艺流程为: 预清理→上挂→除油→水洗→除锈→水洗→磷化→水洗→钝化→电泳→喷淋→水洗→烘 干→下挂。 (2)电泳工件的底材及前处理对电泳涂膜有极大影响。 铸件一般采用喷砂或喷丸进行除锈,用棉纱清除工件表面的浮尘,用 80#~120#砂纸清 除表面残留的钢丸等杂物。 钢铁表面采用除油和除锈处理, 对表面要求过高时, 进行磷化和 钝化表面处理。 黑色金属工件在阳极电泳前必须进行磷化处理, 否则漆膜的耐腐蚀性能较差。 磷化处理时,一般选用锌盐磷化膜,厚度约 1~2μm,要求磷化膜结晶细而均匀。 (3)在过滤系统中,一般采用一级过滤,过滤器为网袋式结构,孔径为 25~75μm。 电泳涂料通过立式泵输送到过滤器进行过滤。从综合更换周期和漆膜质量等因素考虑, 孔径 50μm 的过滤袋最佳,它不但能满足漆膜的质量要求,而且解决了过滤袋的堵塞问题。
电泳涂装与其他涂装方法相比较
yuan, a n increase of 17.5% ; local governme nt general budget revenue of 500 million Yua n, ... Painti ng, model culture creates new Ma Chur ch community, creating Lake sceni c spot culture e ducation base, received hig h eval uation from provincial a nd munici pal di sci pline Inspe ction Commission, the people's daily spe cial rep ort. Consta ntly prom ote indepe ndent Commissi on agai nst corr
电泳法可分为自由电泳(无支持体)及区带电泳(有支持体)两大类。
自由电泳包括Tise-leas式微量电泳、显微电泳、等电聚焦电泳、等速电泳及密度梯度电泳。
区带电泳则包括滤纸电泳(常压及高压)、薄层电泳(薄膜及薄板)、凝胶电泳(琼脂、琼脂糖、淀粉胶、聚丙烯酰胺凝胶)等。
圆盘电泳槽:有上,下两个电泳槽和带有铂金电极的盖。上槽中具有若干孔,孔不用时,用硅橡皮塞塞住.要用的孔配以可插电泳管(玻璃管)的硅橡皮塞。电泳管的内径早期为5~7mm,为保证冷却和微量化,现在则越来越细。
垂直板电泳槽:垂直板电泳槽的基本原理和结构与圆盘电泳槽基本相同。差别只在于制胶和电泳不在电泳管中,而是在两块垂直放置的平行玻璃板中间。
水平电泳槽:水平电泳槽的形状各异,但结构大致相同。一般包括电泳槽基座,冷却板和电极。
要了解电泳整流器首先要了解什么是电泳
电泳是电泳涂料在阴阳两极,施加于电压作用下,带电荷之涂料离子移动到阴极,
并与阴极表面所产生之碱性作用形成不溶解物,沉积于工件表面。