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1. 甲醛变性的琼脂糖(Agarose) 凝胶的配制
在250 mL的锥形瓶中准确称量2 g Agarose (Sigama),再加20 mL 10×TAE Buffer,144 mLDEPC处理过的双蒸水,微波炉中化胶,待冷却至50-60℃加EB至终浓度≤0.5 μg/mL。在通风橱中加入36 mL甲醛,放置一段时间以减少甲醛蒸汽。
2. RNA的甲醛变性电泳
(1) 样品制备
RNA总量:10 μg
5×甲醛凝胶电泳缓冲液:4 μl
甲醛: 3.5 μl
甲酰胺:10 μl
加入无菌离心管中混合,95℃水浴变性2 min(或55℃,15 min),取出后放入冰中冷却。
(2) 加入2 μl无菌的DEPC处理的加样运载液。(使用加样运载液的目的有三: 增大样品密度,以确保DNA均匀进入样品孔内;使样品呈现颜色,便于加样操作;能明确显现样品在电泳胶上的泳动位置。以 0.5 X TBE作电泳液时,溴苯酚在琼脂糖中的泳动速率与长 300 bp 的双链线状DNA相同,而二甲苯氰FF 的泳动速率与长4 kb 的双链线状DNA相同。)
(3)将胶板浸没在1×甲醛凝胶电泳缓冲液中,点样前5 V/cm预跑5 min。点样后3-4 V/cm电泳。
(4)电泳结束后(溴苯酚蓝迁移到约8 cm处),紫外灯下观察, 照相。
1. 材料:植物总RNA 5-10 μg
2. 试剂
(1)加样运载缓冲液(Loading buffer)
50% 甘油
1 mmol/L EDTA (pH8.0)
0.25%溴酚蓝
25%二甲苯氰FF
(2)10×TAE Buffer
(3)5×甲醛凝胶电泳缓冲液:
0.1 mol/L MOPs (pH7.0)
40 mmol/L乙酸钠
5 mmol/L DETA(pH8.0)
(4)甲醛,甲酰胺
3. 仪器:电泳装置,紫外透射观测仪
电泳漆又叫电泳涂料。 早期以阳极电泳涂料为主,目前逐渐被阴极电泳涂料取代。 电泳涂料又可分为单组份和双组份两种,目前以双组份为主。 从颜色可分:黑色、灰色、白色和彩色。 从原料...
您说的是烘烤过的呗?一般比较常用是发烟也就是浓,这个便宜一些,哪都有卖,就是操作起来得小心;另外还有专用脱漆剂也可以,不过价格比较贵;再如果又抛丸设备就可以用机器走一遍就OK了。就想到这些,希望能帮到...
电泳槽的使用方法1、 将凝胶密封条框放在平板上,然后将凹型玻璃板与平板玻璃重叠2、 将两块玻璃立起来使其底端接触桌面,用手将两块玻璃板夹住放入电泳槽内,然后插入斜楔板(直面对玻璃,斜面对槽)到适中程度...
电泳的工艺流程--铝合金电泳
电泳的工艺流程 -- 铝合金电泳 .txt 对的时间遇见对的人是一生幸福; 对的时间遇见错的人是 一场心伤;错的时间遇见对的人是一段荒唐;错的时间遇见错的人是一声叹息。电泳的工艺 流程 -- 铝合金电泳 首先:电泳涂装 (electro-coating) 是利用外加电场使悬浮于电泳液中的颜料和树脂等微粒定 向迁移并沉积于电极之一的基底表面的涂装方法。电泳涂装的原理发明于是 20 世纪 30年代 末,但开发这一技术并获得工业应用是在 1963 年以后,电泳涂装是近 30年来发展起来的一 种特殊涂膜形成方法,是对水性涂料最具有实际意义的施工工艺。具有水溶性、无毒、易于 自动化控制等特点,迅速在汽车、建材、五金、家电等行业得到广泛的应用。 电泳涂装是把工件和对应的电极放入水溶性涂料中,接上电源后,依靠电场所产生的物理化 学作用,使涂料中的树脂、颜填料在以被涂物为电极的表面上均匀析出沉积形成不溶于
电泳工件前处理的目的-电泳加工
电泳加工为什么要有前处理工序 在电泳前处理的工艺中有除油、除锈、磷化、表调等工序的互相配合。可以 说前处理在电泳涂装中是不可或缺的, 它关系着之后电泳后电泳漆槽液的稳定性 和工件表面涂膜的质量。 本文就从磷化角度简单阐述前处理在电泳中的重要性问 题。 为获得电泳工件涂层涂膜的耐久性、 耐腐蚀性,都采用磷化处理作为涂装的 前处理。磷化处理(又称磷酸盐化学处理)是利用磷酸的离解(平衡)反应在清 洗(脱脂)过的金属底材表面上析出不溶性的磷酸金属盐的(磷化膜)技术。磷 化膜的功能是提高涂布在其上的涂膜(电泳涂膜)的附着力和耐蚀性。 关于附着力,因所制得磷化膜结晶微溶入金属表面, 结晶的附着力良好。 还 有,由于无数的结晶的表面凹凸,表面积增大,提高了涂膜的附着力。然后,随 着涂膜附着力的提高, 防止腐蚀生成物质的侵入, 而提高了其耐蚀性 (尤其能抑 制漆膜下的扩蚀)。 未磷化处理过的短期内涂膜就起