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是指用特殊方法脱去了植物细胞壁的、裸露的、 有生活力的原生质团。没有细胞壁，但具有活细胞的一切特征。
①无细胞壁障碍，可以方便地进行有关遗传操作，并可以对膜，细胞器等进行基础研究。
②具有全能性，并能进行人工培养发育成完整植株。
③原生质体适合进行诱导融合形成杂种细胞。
主要来源:植物的叶片，根尖，花粉，愈伤组织细胞等。
机械分离法:常用于分离藻类原生质体，采用渗透方法使细胞发生质壁分离，用刀把细胞壁切破，使原生质体流出。(手工操作难度大，得率低，费时费力)
酶解分离法:用酶(琼脂酶，果胶酶，纤维素酶等)将细胞壁分解。(条件温和，原生质体完整性好，活力高，得率高) 因此原生质体制备多采用酶解法，此法操作过程分为:取材消毒，酶解制备， 原生质体收集。
半透膜和原生质层有区别：半透膜 半透膜是一种只给某种分子或离子扩散进出的薄膜，对不同粒子的通过具有选择性的薄膜。例如细胞膜、膀胱膜、羊皮纸以及人工制的胶棉薄膜等。现代半透膜还用于多孔性壁(如无釉陶瓷)...
1公分国槐价格6元， 2公分国槐价格12元， 3公分国槐价格18元， 4公分国槐价格50元， 5公分国槐价格80元 6公分国槐价格120元 7公分国槐价格160元 8公分国槐价格220元（以上国槐树苗...
40元一棵。国槐为落叶乔木，高6-25米，干皮暗灰色，小枝绿色，皮孔明显。奇数羽状复叶长15-25厘米；叶轴有毛，基部膨大；小叶9-14片，卵状长圆形，长2.5-7.5厘米，宽1.5-5厘米，顶端渐尖...
原生质体的纯化方法:沉降法、漂浮法、界面法。
即检验所获得的原生质体是否是真正的原生质体
(1)低渗胀破法:把原生质体放入低渗透溶液中，在显微镜下观察原生质体从低渗溶液中吸水胀破的过程。如果是真正的原生质体，因为没有细胞壁，这样在胀破后留下的残迹应该是无形的。如果原生质体还带有部分细胞壁，则原生质体从无壁部分吸水向外膨胀直至胀破，破碎后留下的残迹仍保持半圆形的细胞壁。
(2)荧光染色法:将原生质体放入离心管中，加入0.7mol/L甘露醇配置的 0.05%~0.1%荧光增白剂溶液，染色5~10min，离心、洗涤除去多余的染料，在荧光显微镜下观察。绿色光显示纤维素的存在，发出红色光的是没有纤维素的真正的原生质体
检验原生质体是活细胞还是死细胞
染色法:
①二乙酸荧光素(FDA)法:FDA本来没有荧光，当其进入细胞后被脂酶分解为具有荧光的极性物，不能透过质膜，而是留在细胞内发出荧光。因此能发出荧光的是具有活性的原生质体。
②酚藏花红染料法:具有活力的原生质体吸收染料显红色;无活力的不能吸收染料而显示白色。
③伊文思蓝染色法:有活力的细胞不能吸收染料为无色;而没活力的细胞则能吸收染料显蓝色。
其他法:①胞质环流法②渗透压变化③氧电极法④形态观察法
主要有液体浅层培养法、液体悬滴培养、固体平板法、固液双层培养法(应用最广泛)、琼脂糖珠培养法
经原生质体培养的植株再生一般经过细胞壁再生，细胞分裂成细胞团、愈伤组织(或胚状体)、植株再生这几个过程。
①细胞壁再生:原生质体在合适条件下短时间内开始膨胀，叶绿体重排，并开始合成新的细胞壁，进而由球形变成椭圆形。
②细胞分裂:不同的植物细胞分裂时间不同。为了细胞能持续分裂，应注意及时添加新鲜培养液。
③愈伤组织:细胞不断分裂形成细胞团，并进一步形成愈伤组织。一些植物由细胞系形成胚状体。愈伤组织诱导:在合适的培养基，通过调节生长素和细胞分裂素的比例。
④植株再生，诱发芽和根的生成。 诱导胚状体:在原生质体培养时直接诱发胚状体的生长，从而发育成完整植株。
①植物原生质体是细胞无性系变异和突变体筛选的重要来源;
②植物原生质体是细胞融合工作的基础;
③植物原生质体是植物遗传工程的理想受体和遗传饰变的理想材料;
④在细胞生物学与遗传理论研究上的应用。
蝴蝶兰原生质体提取方法的优化
蝴蝶兰原生质体提取方法的优化
以蝴蝶兰自交品种NOⅡ的无菌苗叶片为试材,采用单因素试验和正交试验,比较不同酶的种类、酶液浓度、材料和酶液的比例、渗透压、酶解时间及纯化条件对原生质体产量和活性的影响,并用荧光显微镜观察去壁情况。结果表明:在同一种条件下1 g蝴蝶兰叶片加入10 mL酶解液中,酶解液含1.0%纤维素酶R-10,1.0%果胶酶,0.5 mol·L~(-1)甘露醇,酶解3 h,有活力的原生质体产量最高,其产量为1.3×10~5个·g~(-1),活性达81.90%。
柑桔属与九里香属的原生质体融合及植株再生
柑桔属与九里香属的原生质体融合及植株再生
采用ＰＥＧ（聚乙二醇）诱导原生质体融合，进行了Ｐａｇｅ桔柚（Ｃｉｔｒｕｓ ｒｅｔｉｃｕｌａｔａ Ｂｌａｎｃｏ×Ｃ．ｇｒａｎｄｉｓ Ｏｓｂ．ｃｖ．Ｐａｇｅ）九里香（Ｍｕｒｒａｙａ ｐａｎｉｃｕｌａｔｅ Ｊａｃｋ．）的体细胞杂交，培养获得了４０株再生植株，经细胞学检查和同工酶分析鉴定，确认有２株为Ｐａｇｅ桔柚九里香的体细胞杂种植株，它们均为四倍体（２ｎ＝４ｘ＝３６），具有双亲综合的谷草转氨酶（ＧＯＴ）
《植物组织培养技术》是教育部推荐使用的教材，是依据《2003-2007年教育振兴行动计划》和教育部《关于制定（2004-2007年职业教育教材开发编写计划）的通知》精神组织编写的。
《植物组织培养技术》内容包括绪论、实验室仪器设备和使用方法、植物组织培养工厂的设计、组织培养基本技术、植物快速繁殖技术、无病毒苗的培养、花药和花粉培养、细胞培养、原生质体培养和体细胞杂交、种质保存，以及常见园林植物的快速繁殖方法、实验与实训等。通过《植物组织培养技术》，可了解植物组织培养工厂的流程设计，熟悉组织培养实验室设备和使用方法，掌握植物组织培养的基本技术、快速繁殖与脱毒技术，以及南北方常见实用品种的组织培养技术。
《植物组织培养技术》适合高等、中等职业技术院校、大专函授、成人高校农林类专业使用，也是从事植物组织培养工作的人员职业培训教材和自学用书。
《普通高等教育“十三五”规划教材：植物组织培养（第2版）》全面系统地介绍了植物组织培养的概念、原理、方法与应用技术，分理论篇和应用篇，共18章。理论篇包括绪论、植物组织培养的基本原理、实验室的布局及设备、植物组织培养的基本技术、植物器官培养、植物组织培养、植物细胞培养、植物原生质体培养等内容，阐述了植物组织培养的基本概念、基本原理、基本方法与技术、历史、发展方向与新技术；应用篇，包括植物胚培养、植物离体快繁、人工种子、植物脱毒苗培育、植物体细胞无性系变异及筛选、次生代谢产物生产和生物转化、植物种质资源的离体保存、植物单倍体培养、体细胞杂交、植物遗传转化等内容，详细介绍了植物组织培养在农业、林业、工业、医药业等方面的应用方法与技术，全面地反映了国内外新研究成果与动态，并重点描述了75项经典或新的应用实例。
《普通高等教育“十三五”规划教材：植物组织培养（第2版）》概念准确，内容丰富，资料翔实，信息量大，技术方法详细具体，图文并茂，理论与实践并举，可作为植物生产类、草业科学类、森林资源类、环境生态类及生物科学类等各专业高年级本、专科生及研究生教材，也可供相关科研人员与生产者使用。
本书系统地论述了植物生物技术的理论和方法，既介绍了基本知识，也反映了该领域的最新研究进展。全书共17章，分三大部分。第一部分为植物组织和细胞培养的基本技术和方法，共7章，对离体操作的原理、植物组织和细胞培养、原生质体培养及融合、植物脱毒与快繁等方法和技术进行了系统描述；第二部分介绍了植物基因工程的原理和技术，共6章，包括基因克隆的方法、转化载体的构建、遗传转化技术、转基因检测、转基因植物的遗传及安全评价等；第三部分内容为植物分子标记及辅助选择应用，共4章，主要论述分子标记连锁图构建、植物基因组研究概况、分子标记辅助选择育种及其应用实例等。
本书是植物科学技术专业的教材，主要用于农林院校相关专业本科生、研究生教学。本书也是从事植物生物技术研究人员的一本有益参考书。
植物组织培养技术内容简介