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实验时间 | 石蜡切片免疫组化实验(含详细步骤)

2018/09/06144 作者:佚名
导读:免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。根据标记物的不同分为:免疫酶法、免疫荧光法、亲和组织化学法、免

免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。根据标记物的不同分为:免疫酶法、免疫荧光法、亲和组织化学法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自影法等。其中前三种最常用。

实验原理

根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔 IgG 分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后,加入底物显色。

实验步骤

1. 石蜡切片置于 67 ℃ 烘箱中,烘片 2 小时,脱蜡至水,用 pH 7.4 的 PBS 冲洗三次,每次 3 分钟(3 × 3')。

2. 取一定量 pH = 6.0 柠檬酸盐缓冲液,加入微波盒中,微波加热至沸腾,将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上,放入已沸腾的缓冲液中,中档微波处理 10 分钟,取出微波盒流水自然泠却,从缓冲液中取出玻片,先用蒸馏水冲洗两次,之后用 PBS 冲洗 2 × 3'(注:不是所有的抗体都需要微波修复的,视具体情况而定)。

想了解更多实验步骤请扫以下二维码或点击「阅读原文」查看。

*文章为作者独立观点,不代表造价通立场,除来源是“造价通”外。
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