外植体采集：剪取卤蕨成熟孢子叶于自封袋中带回，叶背面孢子囊群为深褐色，及时处理新鲜材料。

孢子叶表面消毒：孢子叶横向裁剪为1厘米×3（-4）厘米的条带状小片段，置100毫升广口瓶中，饱和洗衣粉溶液浸泡，加入1滴吐温-80，盖瓶盖，浸洗20分钟，期间每3-5分钟轻轻旋摇瓶体数次；自来水缓缓冲洗孢子叶10分钟；在超净工作台上，弃瓶内自来水，加入70%的酒精浸泡20秒，弃酒精，加入0.1%二氧化汞消毒2.5分钟，再以无菌水冲洗5次，备用。

孢子无菌萌发：用解剖刀刮取孢子叶上的孢子囊群，将其分散接种于孢子无菌萌发培养基上进行培养。

• 孢子无菌萌发培养基配方为：1/4MS培养基 0.2克/升蔗糖 6-BA0.2毫克/升 琼脂7克/升。

• 培养条件均为：12小时光照 12小时黑暗，光照强度2500勒克斯，25±20℃。

原叶体增殖培养：将孢子萌发形成的原叶体剪切至原叶体增殖培养基中进行原叶体增殖培养。每50天更换一次培养基。

• 原叶体增殖培养基配方为：1/4MS基本培养基 15克/升蔗糖 6-BA0.06毫克/升 2，4-D0.1毫克/升 琼脂7克/升。

• 培养条件均为：12小时光照 12小时黑暗，光照强度2500勒克斯，25±2℃。

孢子体的诱导培养：将形成的原叶体粉碎转接至孢子体诱导培养基诱导产生幼孢子体。

• 培养基配配方为：1/4MS基本培养基 GA30-1.2毫克/升 5克/升蔗糖 琼脂7克/升 水解酪蛋白100毫克/升。

• 培养条件均为：12小时光照 12小时黑暗，光照强度2500勒克斯，25±2℃。

生根培养与炼苗：将诱导的幼孢子体分离出来，转接至生根培养基诱导孢子体形成不定根。

• 培养基配配方为：1/4MS基本培养基 15克/升蔗糖 2，4-D0.05毫克/升 琼脂7克/升，10-15天肉眼可见幼孢子体不定根根尖刚突出后，随即在培养室内松开、虚掩瓶盖10天，期间培养基因水分较快消耗而收缩，但不致干涸，孢子体结构分化更完善。

• 培养条件均为：12小时光照 12小时黑暗，光照强度2500勒克斯，25±20℃。