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在20世纪70年代,由于巴西热带雨林被大量砍伐,洋苏木大量减少,苏木素的产量随即大量减少。苏木素的价格上升惊人,因而大大提高了组织病理学诊断的成本,引起了寻找苏木素替代品的高潮。不过,在各种苏木素的替代品的地位真正确立之前,苏木素又重返市场,又在组织病理学诊断中发挥其重要作用。到2013年为止,几种推荐使用的替代染剂有铬天青、焙花青、茜素紫(又名焦没食子酚酞、棓因)。这些染料都用三价铁离子作为媒染剂。焙花青还可以用铬矾作媒染剂。
常用的两种铁苏木素溶液有Weigert氏溶液(使用氯化铁铵作为媒染剂)和Heidenhain氏溶液(使用硫酸铁铵作为媒染剂)。它们都是活泼的氧化剂,不能长期保存。铁苏木精溶液能够用于几乎所有的固定剂,而且如果用于媒染的过量的铁离子都被冲洗净的话,能够永久着色。在酒精中浸泡多年的组织往往不易着色,这时就可以选择铁苏木素染色,效果很好。铁苏木素溶液会把细胞核染成灰黑色,常常用于显微照相。
Weigert
Weigert氏苏木素配方是实验室使用的标准铁苏木素溶液,特别是在染色显示肌纤维时。当使用的生物材料或已经用过的试剂中含有酸时,最适合使用的就是Weigert氏苏木素溶液,因为这时所有的铝苏木素溶液染细胞核时都会褪色。
A液
1g苏木素
100ml无水乙醇
B液
4ml 30%无水氯化铁溶液
1ml浓盐酸
100ml蒸馏水
在酒精中溶解苏木素,微热。在另一个容器中混合盐酸、氯化铁和蒸馏水。两种溶液都很稳定,可以放置6个星期不变质。染色前,把两溶液等量混合,得到深黑色混合液,即可染色。混合液可以保存1~2天。
Heidenhain
Heidenhain氏苏木素配方用于细胞学染色观察,特别是用于一些较薄的组织的回染。它可以用于细胞核的染色观察,能够清楚地显示染色体、染色质以及细胞质中线粒体的位置。此外,还可以使髓鞘染色。
染色剂:
0.5 g 苏木素
10 ml 95%乙醇
90 ml蒸馏水
媒染剂:
25 g 硫酸铁铵
100 ml蒸馏水
把染色剂和媒染剂分开配制,放置4~5星期成熟。染色时再混合。
苏木素和伊红在组织学上被经常使用,与碘液不同,这是一种永久染色剂。其他常用的含有苏木素的染色剂有磷钨酸苏木素染色剂,也就是磷钨酸与苏木素的混合物。苏木素染色剂经常为组织的研究使用。 明矾和三价铁盐常常被用作媒染剂,展示核和细胞质结构。这些媒染剂的原理都是形成媒染剂-染料-组织复合体,从而显示颜色。使用的盐不同颜色也不同: 当用铁盐呈现深蓝色颜色沉淀,用铝盐通常显示蓝白色。下面分别介绍铝苏木素溶液和铁苏木素溶液。
苏木素染色(Largetrophozoitesstainedwithironhematoxylin)01:内质呈淡蓝黑色,外质收缩,剩下部分不着色或色泽更浅。圆形细胞核呈蓝黑色。居中的核仁呈黑色小圆点...
苏木素染色后的细胞核呈现蓝色,细胞浆呈现粉红色或红色。进行免疫染色后的复染,操作步骤简便,操作时间短。可以操作步骤简便,操作时间短或培养细胞的染色,或与免疫组织化学、免疫细胞化学、免疫荧光、原位杂交等...
苏木素的染色法。苏木素是从原产中南美的洋苏木(Haematoxylon campechianum L.)的心材提取出来的浅黄褐色的结晶。氧化后变成氧化苏木素(haematein)。苏木素和氧化苏木素都...
常用的两种铝苏木素溶液有Ehrlich氏溶液和Harris氏溶液。铝苏木素溶液能够把细胞核染成半透明的浅蓝色,在酸性环境下会迅速变成红色。作为媒染剂使用的钾铝硫酸盐在碱性溶液通常结合与氢氧根形成不能溶解的氢氧化铝。 在过量的酸中,氢氧化铝由于缺乏OH-离子而溶解,因此,铝苏木素溶液的酸性溶液变成红色。 在铝苏木素溶液染色时,被染色的部分通常转移到一种碱性溶液中,中和酸并释放氢氧根,形成一个不溶的蓝色铝苏木精复合物。
由于自来水碱性不十分强,通常用每升含有33.5 g NaHCO4和20克的MgSO4,并加入百里香酚兰的溶液代替。使用冷水会减慢染色过程。 实际上,使用在10°C之下的冷水甚至可能导致组织呈现红色。
Ehrlich
1 g 苏木素
100 ml无水乙醇
60 g 明矾(铝钾硫酸盐)
100 ml甘油
100 ml蒸馏水
10 ml冰醋酸(HOAc)
首先,在100 ml无水乙醇中溶解1 g 苏木素,微热。 然后,在100 ml蒸馏水中溶解60 g明矾加入100 ml甘油微热。 第三步,混合二种溶液并且增加10 ml冰醋酸。 然后转移到用棉花轻轻塞住口的烧瓶中,暴露在空气和阳光中几个星期,每天震荡溶液。在这个过程中,苏木素被部分氧化。 最后,把溶液转移到一个封口很严的试剂瓶中在温暖处存放。
染色时,有时需要加入0.3 g碘酸钠。 因为苏木素溶液被氧化,溶液的颜色从紫色将变成深红,而醋酸刺激性气味将变成宜人的芳香。 甘油作为稳定剂并且减速溶液的蒸发。 然而,甘油可以减速染料的成熟,所以可以在最初的制备以后的4到6个星期后加入。
Ehrlich的苏木素溶液染色时,黏多糖物质例如软骨素也被染成蓝色。 染色时间通常是15到40分钟。
Harris
1 g 苏木素
10 ml无水乙醇
20 g 明矾(铝钾硫酸盐)
0.5 g 氧化汞
190 ml蒸馏水
10 ml冰醋酸(HOAc)
首先,在10 ml无水乙醇中溶解1 g 苏木素,微热。 然后,在500 ml烧杯中加入190ml蒸馏水和20 g明矾。 第三步,加入氧化汞,立即插入冷水中迅速降温。要用开口较大的容器,防止加入氧化汞后放出氧气引起爆炸。加入氧化汞后,溶液应该呈现深紫色。加入4%的l冰醋酸能够使对细胞核染色的特异性更强。 最后,把溶液过滤,转移到一个密封的试剂瓶中,立即使用或长期保存。
Harris氏苏木素配方染色被用于细胞核的常规检查和性染色体的检查。染色时间通常是5到20分钟
Cole
1.5 g 苏木素
50 ml1%的碘的95%乙醇溶液
700ml饱和的明矾溶液
250 ml蒸馏水
把苏木素溶解到250ml温的蒸馏水中,加入碘酒,加入明矾溶液,煮沸。
Cole氏苏木素染色溶液使用前要冷却,过滤。染色时间通常是10分钟。
Mayer
比Ehrlich氏苏木素配方灵敏度好,不会或很少会把黏多糖物质染色。
1 g 苏木素
0.2g NaIO3
50g 明矾
1g柠檬酸
50g水合三氯乙醛
1000 ml蒸馏水
把苏木素,明矾,碘酸钠加入1000ml蒸馏水溶解,过夜放置,以便苏木素充分溶解。加入柠檬酸,水合氯醛,煮沸5分钟后冷却。
1g苏木素
20g磷钨酸
1000ml蒸馏水
用多份水分别溶解溶质,然后再混合起来。光照下放几个星期成熟。加入0.177g钾可以立即成熟。
配好后,染色剂的颜色为红棕色到紫色。染色时,细胞核,肌动纤维为蓝色,骨骼、软骨为橘红色、红棕色直到深砖红色。由于染色是逐步进行的,所以最好每小时显微镜观察一次。酒精可以洗去红色,因此,冲洗时间要短。染色时间是12~24小时。 2100433B
多壁碳纳米管修饰电极对巴西苏木素的定量测定
采用多壁碳纳米管修饰玻碳电极测定巴西苏木素的含量,在优化条件下,巴西苏木素在pH为5.45的B-R缓冲液中在6.8×10-5~8.2×10-3mol.L-1浓度范围内与峰电流呈线性关系(R2=0.989,n=7),对应的线性回归方程为Ip(A)=1.17510-4C(mol.L-1)-5.73210-7,最低检出浓度为2.2×10-5mol.L-1。方法操作简单,灵敏度高。
UPLC测定云实皮中二氢红花菜豆酸苷和原苏木素B的含量
目的:建立UPLC测定云实皮中二氢红花菜豆酸苷和(±)原苏木素B含量的方法。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,检测波长266 nm,柱温45℃。结果:二氢红花菜豆酸苷、(±)原苏木素B分别在0.497~79.6 mg·L-1(0.999 8),1.50~240 mg·L-1(0.999 9)有良好的线性关系;平均加样回收率为100.9%(RSD 1.9%),99.89%(RSD 1.8%)。结论:该方法简便、准确,可用于评价云实皮药材的质量。
基本信息
中文名称:巴西苏木素
中文同义词:巴西木红素;苏枋精;巴西灵;巴西苏木素;苏枋精
英文名称:BRAZILIN
英文同义词:2-d)pyran-3,6a,9,10(6h)-tetrol,7,11b-dihydro-benz(b)indeno(;6a,9,10(6h)-tetrol,7,11b-dihydro-2-d]pyran-(6as-cis)-benz[b]indeno[;7,11b-dihydrobenz(b)indeno(1,2-d)pyran-3,6a,9,10(6h)-tetrol;brasilin;braziletto;hypernicextract;limawoodextract;pernambucoextract
CAS号:474-07-7
分子式:C16H14O5
分子量:286.28
EINECS号:207-477-6
物理化学性质
密度: 1.604g/cm3
沸点: 555.8°C at 760 mmHg
闪点: 289.9°C
蒸汽压: 3.44E-13mmHg at 25°C
熔点 156-157℃
木部含巴西苏木素(Brasilin), 其遇空气后即氧化为巴西苏木红素(Brasilein).亦含苏木酚(Sappanin), 可作有机试剂, 检查铝离子.尚含挥发油, 油的主要成分为水芹烯(α-l-Phellandrene)及罗勒烯(Ocimene).还含鞣质.
木部含无色的原色素-巴西苏木素约2%。巴西苏木素遇空气即氧化为巴西苏木红素。另含苏木酚,可做有机试剂,检查铝离子。又含挥发油,油的主要成分为水芹烯及罗勒烯。
对中枢神经系统的作用,适量的苏木水, 以不同的给药方法, 对小鼠、家兔及豚鼠, 均能引起催眠作用, 在大剂量时尚能引起麻醉作用, 甚至死亡.苏木有一定的镇痛作用, 该作用与其催眠作用有一定联系.苏木水能对抗马钱子碱与可卡因的中枢神经兴奋作用, 但不能对抗吗啡的兴奋性.
对心血管的作用,动物实验表明: 苏木水能使离体蛙心的收缩力增强, 振幅显著增大, 且心脏越衰弱其作用越明显.并可使由枳壳煎剂减弱的心收缩力有所恢复.还能解除水合氯醛、奎宁、毛果芸香碱、毒扁豆碱、尼可丁等对离体蛙心的毒性, 在心脏未完全停止跳动以前, 苏木水能恢复其跳动.在蟾蜍下肢灌流时, 苏木水亦能使蟾蜍的血管收缩度略有增加;以后用亚硝酸钠也不能使血管扩张.如先用亚硝酸钠, 再用苏木水同样不能使血管收缩.苏木水对狗的血压和呼吸无明显影响, 与肾上腺素或组胺合用, 亦无显著的协同作用.
抗菌作用,苏木在试管内能抑制葡萄球菌的生长.苏木浸煎液对白喉杆菌、肺炎双球菌、流行性感冒杆菌、副伤寒丙杆菌、弗氏痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、百日咳杆菌、伤寒杆菌、副伤寒甲、乙杆菌及肺炎杆菌均有比较明显的抑菌作用(试管法和平板法).
对平滑肌的作用,苏木水不能解除组胺引起的支气管痉挛.苏木水对小鼠的离体子宫有抑制作用;如与肾上腺素合用, 作用更为明显.苏木水对家兔肠管无明显作用, 但可加强肾上腺素对肠管的作用.
抗癌作用,100%苏木水提取液(2.5μl/ml浓度)对人早幼粒白血病细胞(HL-60)、人红髓白血病细胞(K562)、小鼠成纤维瘤细胞株(L929)及小鼠淋巴瘤细胞株(yac-1)均有明显的杀伤作用.给荷瘤小鼠腹腔注射0.2ml/d, 连续7天, 平均延长生存期185%;注射0.15ml/d时, 延长生存期为126.8%, 注射0.1ml/d时, 不能延长生存时间.
苏木煎液腹腔注射, 对白血病P388、L1210小鼠(DBA/2)均有较强的抑制和治疗作用, 能明显延长荷瘤小鼠的生存时间.但灌胃给药则无明显影响.
其他作用,实验表明: 苏木对醋酸铅引起的家兔贫血, 无增高血红蛋白和红细胞的作用;但醋酸铅和苏木合用, 家兔的血红蛋白与红细胞偶有增高现象.
苏木给小鼠或大鼠皮下注射,用小剂量时(0.1ml)呈利尿作用, 而剂量加大则无利尿作用.
苏木煎剂在 10%以上对体外肝蛭有效.试用于牛体内, 抗肝蛭的疗效不确实.对蛔虫和绦虫无驱虫效力.
苏木水给狗腹腔或皮下注射, 可引起呕吐和腹泻.但苏木水无减轻皮肤刺激药的作用;亦无解热作用。
木材为散孔材,材质坚重,干缩系数小,木质部含无色的原色素下巴西苏木素约2%,巴西苏木素遇空气即氧化为巴西苏木红素,并含有苏木素,可做有机试剂,检查铝离子;还含有挥发油,种子含脂肪油约16%,皂化价180.3605,酸价3.9802,碘价131.521,属干性油。
干燥心材供药用,可行血破瘀,消肿止痛。苏木全年可采,除去外皮和边材,只取心材晒干备用。干燥心材呈圆柱形,长8-100厘米,直径3-10厘米,表面暗棕色或黄色,可见红黄色相间的纵向条纹;横断面年轮明显,有时中央可见白色的髓。无臭,味微涩。热水浸泡液呈鲜艳的绯红色,加醋后变为黄色,再加碱又变为红色,以辨真伪。一般以粗大坚实,色红黄者为佳。
【性味功效】破血,化淤,降压,补肾。
【主治】多血症,高血压,肾虚腰痛,月经不调。
【药理作用】
抗炎作用巴西苏木素对角又菜胶所致大鼠脚关节水肿的试验表明其有抗炎活性,并比洋苏木精更强。
抗菌作用对革兰氏阳性和阴性菌均有抗菌作用。
抗肿瘤作用水提取液对人早幼粒白血病细胞株、人红髓白血病细胞株、小鼠淋巴瘤细胞株、小鼠成纤维瘤细胞株均有明显的杀伤作用。
其他作用苏木还有一定的镇痛、利尿、中枢抑制作用。