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SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳操作流程

1.将玻片装置搭建起来,加水静置,检查是否有渗漏。

2.配制分离胶 加入2玻片间,加时尽量减少气泡,由玻片一端连续、快速、均匀的注入,可适当摇晃,使得分离胶上界面尽量水平;加保护液(0.1% SDS)静置凝聚。加保护液时,枪头应均匀扫过玻片上沿,切不可由一端注入。

3.配制浓缩胶 待分离胶凝固后,去除保护液,依同样方法加入上层浓缩胶,并插入梳齿模具,静置。插入模具后,加少许浓缩胶,补平液面 。

4.配制电泳缓冲液,浓缩胶凝固后,玻片取下,放入电泳槽中,有凹陷玻片朝向内侧,并将玻片用夹子夹紧,在外侧玻片粘上凹槽指示薄片,取下梳齿,加入电泳缓冲液,平板内侧液面以刚没过凹槽上沿为宜。

5.样品处理 将待分析样品配制成合适的浓度或浓度梯度溶液,连同marker分装于Ep管中,并加入loading buffer ,100℃煮沸。此步可调至步骤3后做,一般4完成后不宜等待过长时间,最好立即加样、通电。

6.将样品液依次加入梳齿形胶孔中,每孔上样量10ul。

7.接通电源,设为恒流10 mA,待样品跑至分离胶界面后,调整电流为15 mA。

8.胶跑完后,固定(0.5h~)、染色(1.5h~)、脱色。

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page造价信息

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手动操作机构

  • Nkm1、Nkm1L、Nkm1Z-100(三极/四极)
  • 南冠
  • 13%
  • 广东南冠电气有限公司
  • 2022-12-06
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手动操作机构

  • Nkm1、Nkm1L、Nkm1Z-630(三极/四极)
  • 南冠
  • 13%
  • 广东南冠电气有限公司
  • 2022-12-06
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电动操作机构

  • Nkm1、Nkm1L、Nkm1Z-225(三极/四极)
  • 南冠
  • 13%
  • 广东南冠电气有限公司
  • 2022-12-06
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电动操作机构

  • Nkm1、Nkm1L、Nkm1Z-800(三极/四极)
  • 南冠
  • 13%
  • 广东南冠电气有限公司
  • 2022-12-06
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手动操作机构

  • Nkm1、Nkm1L、Nkm1Z-63(三极/四极)
  • 南冠
  • 13%
  • 广东南冠电气有限公司
  • 2022-12-06
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沥青混凝土摊铺机操作

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沥青混凝土摊铺机操作

  • 台·月
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  • 建筑工程
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沥青混凝土摊铺机操作

  • 台·月
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  • 建筑工程
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沥青混凝土摊铺机操作

  • 台·月
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沥青混凝土摊铺机操作

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主机操作流程

  • 594mmX420mmKT板
  • 3块
  • 3
  • 中高档
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  • 2021-11-01
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流程与设计套件

  • 拼插式结构,易于组装和拆卸,可重复使用.由各种颗粒、轴承、轴、轮、齿轮、连接件与特殊件组成,用ABS材料制作.能搭建火中逃生、盖房子、积木分拣流程的设计与优化、积木分拣流程的优化等活动项目.
  • 28套
  • 2
  • 中高档
  • 含税费 | 含运费
  • 2020-04-10
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上墙制度、操作规范、流程图等

  • 400x600材料:进口高透光度环保亚克力定制工艺:进口油墨,进口UV机打印,进口高透光度环保亚克力材料,耐用、防水防晒、不变色;精准激光切割;采用钻石抛光技术,晶莹剔透,角圆滑处理,防止割手;粘贴工艺,经箍牢靠;铣槽工艺:铣槽加工效果好,光洁度高,边缘透亮内容:进口油墨,进口UV机打印
  • 120个
  • 1
  • 高档
  • 不含税费 | 含运费
  • 2022-06-09
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科室制度、流程

  • (1)名称:科室制度、流程栏(2)规格尺寸:900×600×30mm(3)专用铝型材相框,5mm厚透明亚克力面板,面医院专用金属漆,四边可扳开方便随时更换信息内容喷绘,贴墙安装
  • 50个
  • 2
  • 中高档
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  • 2018-08-14
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流程设计套件

  • ABS材质拼插式结构.可完成的试验项目是板房、农家屋舍、二层楼房等常见建筑模型、车辆模型制作流程、小球分拣流程和扫地机器人的多方案设计.控制器采用透明的封装外壳可以清晰地到控制器内部结构,使用通用的
  • 28套
  • 1
  • 中高档
  • 含税费 | 含运费
  • 2019-06-21
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page原理

1.聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体(以后简称单体)在水溶液中聚合而成的亲水性高聚物,是一种透明而不溶于水并有韧性的凝胶。

2.制备凝胶时需要的原料是:丙烯酰胺,亚甲基双丙烯酰胺(双体,用作交联剂)o在水溶液中用催化剂引发聚合。常用的催化剂有:二甲氨基丙腈(DMAPN);过硫酸铵,四甲基乙二胺;过硫酸铵或加核黄素后用紫外光(波长 253.7毫微米)引发聚合。

3.聚合时丙烯酰胺分子通过加成反应形成长链,双体的作用是在长链之间形成交联,成为具有三维网状结构的凝胶(见图1)。所以在凝胶电泳中除了具有电泳的分离外还具有分子筛作用,从而增高了它的分辨能力。

4.聚合时,根据分离的需要,可以用改变单体溶液浓度或增减双体比例的办法制成孔度大小不同的凝胶。在分离血清蛋白时,我们采用的丙烯酰胺总浓度为6.5%,内含单体96%,双休4 5{刍(T一6.5,c一4%)。

5.聚合物分子中含有很多酰胺基,所以凝胶具有良好的亲水性。能在水中溶胀但不溶解。

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page分离技术

PAGE为Polyacylamide Gel Electrophoresis的简写即聚丙烯酰胺凝胶电泳,是一种常用的分离技术。

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page操作流程常见问题

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page作用

SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子的二、三级结构。而强还原剂如巯基乙醇,二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白- SDS胶束,所带的负电荷大大超过了蛋白原有的电荷量,这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异。 SDS-PAGE一般采用的是不连续缓冲系统,与连续缓冲系统相比,能够有较高的分辨率。

浓缩胶的作用是有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选TRIS/HCL缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸。电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,甘氨酸根离子最慢,蛋白居中。电泳开始时氯离子泳动率最大,超过蛋白,因此在后面形成低电导区,而电场强度与低电导区成反比,因而产生较高的电场强度,使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动,形成以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩成一中间层。

此鉴定方法中,蛋白质的迁移率主要取决于它的相对分子质量,而与所带电荷和分子形状无关。

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page语法:

page

:auto | <identifier>

默认值:auto

取值:

auto:参照当前的默认页面<identifier>:指定@page规则下的页面类型定义

说明:

检索或指定显示对象容器时使用的页面类型。参阅@page示例代码:

@page rotated { size: landscape;}p { page: rotated; page - break - before: left;}

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page操作流程文献

SDS-PAGE操作方法要点 SDS-PAGE操作方法要点

SDS-PAGE操作方法要点

格式:pdf

大小:283KB

页数: 12页

1 SDS-PAGE教程 1 SDS-PAGE 原理 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进 SDS(十二烷基硫酸钠) , SDS会与变性的多肽,并使蛋白带负电荷,由于多肽结合 SDS 的量几乎总是与多肽的分子 量成正比而与其序列无关,因此 SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽 的大小有关,在达到饱和的状态下,每克多肽可与 1.4 g 去污剂结合。当分子量在 15 KDa 到 200 KDa 之间时, 蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系, 符合下式: log MW = K – bX,式中: MW 为分子量, X 为迁移率, k、b 均为常数,若将已知分子量的标准蛋白质的 迁移率对分子量对数作图, 可获得一条标准曲线, 未知蛋白质在相同条件下进行电泳, 根据 它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。 SDS-PAGE [Laemmli 法 ] 这种

货代公司操作流程操作部工作流程 货代公司操作流程操作部工作流程

货代公司操作流程操作部工作流程

格式:pdf

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页数: 17页

货代公司操作流程操作部工作流程 I 、客户服务 一、订舱 1. 客户向我司订舱的 2. 客户发来的订舱单需显示以下信息,但不限于此: 1)托运人 /发货人 2)船公司 / 船名 / 航次或船期 3)起运港 4)目的港 /中转港 5)货名 6)柜型、 柜量 7)运价 8)托运人的签字、盖章 3. 客服人员收到订舱单后,须与 SALES核对运价是否正确,并由 SALES在订舱单上签字确认,然 后再向相应船公司订舱 (特殊情况可先口头与 SALES确认 , 待 SALES返回公司再补签字确认 )。向订舱时, 需先在各船公司专用台帐上自编 S/O号。4. 订舱单发出后,客服人员应主动向船公司确认舱位,并将 船公司传回的订舱确认单第一时间传给客户,订舱确认上面的订舱号与船名、航次要清晰、准确,以免 造成混淆。 5. 订舱完毕后,客服人员应及时将资料输入电脑,具体步骤如下: 1) 新建委托 ?C 输

mmap条件

mmap() 必须以PAGE_SIZE为单位进行映射,而内存也只能以页为单位进行映射,若要映射非PAGE_SIZE整数倍的地址范围,要先进行内存对齐,强行以PAGE_SIZE的倍数大小进行映射。

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建造设计手册:无障碍及导向系统设计图书目录

PAGE 006——TEXT 01 SPATIAL SIGNS ON

THE RELATIONSHIP BETWEEN ARCHITECTURE

AND THE DESIGN OF COMMUNICATION MEDIA

Philipp Meuser, Chen Wu

PAGE 018——TEXT 02 SAYING FAREWELL TO

THE WHEELCHAIR RAMP A PLEA FOR MORE

FRANKNESS IN BARRIER-FREE ARCHITECTURE

AND PLANNING

Philipp Meuser, Chen Wu

PAGE 032——TEXT 03 DISABILITIES AND

DISEASES SELECTED PLANNING REQUIREMENTS

Jennifer Tobolla

PAGE 038——BEST PRACTICE DESIGN MANUAL

TEN SPATIAL SITUATIONS AS EXAMPLES OF

BARRIER FREEDOM

Jennifer Tobolla

PAGE 112——PROJECTS

Philipp Meuser, Daniela Pogade

PAGE 412——INDEX 2100433B

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页计数器概述

英文名:page counter;

可以记录你的网页访问次数。

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